微生物学微生物培养基的配制灭菌要点分析.ppt

课堂纪律 严格遵守实验室规章制度 严肃课堂纪律 不允许无故旷课、早退 迟到 工作服 进入微生物实验室的注意事项 1.进入实验室必须穿白大褂 2.实验室内不准吃东西 3.在实验室内不要趴在桌子上 4.实验完成后值日生留下做好清洁工作（值日工作实行组长负责制，纳入实验成绩） 5.离开实验室前洗手 6.实验现象要隔天观察的实验，必须要按时到实验室记录实验现象 实验安排 实验一 微生物培养基的配制和灭菌 实验二 微生物的纯培养技术 实验三 显微镜油镜的使用及细胞形态的观察 实验四 环境因素对微生物的影响 实验五 放线菌、霉菌及酵母菌的形态观察 实验六 水的细菌学检查，土壤微生物的分离 实验七 微生物生理生化反应观察 试验八 微生物遗传实验 试验九 药物的体外抗菌实验及口服药物的细菌检查 实验十 操作考试 实验报告要求 一个实验，一份实验报告，有连续性的实验等到做完后再写实验报告。 实验报告内容： 1.实验项目名称 2.实验目的 3.实验原理 4. 实验步骤 5.实验结果与分析（即使实验失败也要写好分析） 6.思考题 实 验 微生物培养基的配制和灭菌及纯培养 一、微生物培养基的配制和灭菌 目的要求 实验材料 实验程序 1、目 的 了解培养基的配制原理和方法，掌握其配制过程。 了解几种灭菌方法，掌握干热灭菌法和加压蒸汽灭菌法的原理及其使用方法。 2、材 料 和 器 皿 主要药品：牛肉膏、蛋白胨、氯化钠、琼脂、营养琼脂等。 仪器：高压蒸汽灭菌器、恒温干热灭菌箱、紫外线杀菌灯。 其它：天平、药匙、电炉、1mol/L HCl、1mol/L NaOH、pH试纸、三角烧瓶、量筒、玻棒、试管、培养皿、吸管、牛皮纸、纱绳、硅胶塞、标签等。 3、方法和步骤 培养基的配制 培养基和玻璃器材的灭菌方法 培养基的概念及种类 培养基的配方、配制步骤 培养基 是指由人工配制的、适合微生物生长繁殖或产生代谢产物用的混合营养料。 培养基的种类 按照培养基的物理状态可分为 1.液体培养基：不加凝固剂的液体状态培养基。 2.固体培养基：在液体培养基中加入2%左右的凝固剂的固体状态的培养基。 3.半固体培养基：在液体培养基中加入0.2—0.5%凝固剂而成的半固体状培养基。 （2）培养基和玻璃器材的灭菌方法 任何一种培养基一经制成就应及时彻底灭菌，以备纯培养用。一般培养基的灭菌采用高压蒸汽灭菌。 常用的灭菌的方法有：干热灭菌、高压蒸汽灭菌、常压蒸汽灭菌、常压间歇式灭菌超高温灭菌、过滤除菌、辐射灭菌、化学药品灭菌等方法。 本实验培养基的灭菌常使用的是高压蒸汽灭菌，它是利用高温湿热空气使菌体蛋白质凝固变性而达到灭菌的。P.76 * * 微生物学实验 （1）培养基的配制 培养基的介绍 碳源、氮源、无机盐、能源、生长因子、水 营养物质的浓度要适宜 营养物质之间的配比要适宜 培养基的pH值、渗透压、水活度和氧化还原电势等物理化学条件要适宜。 细菌： pH 7.0~8.0 放线菌：pH 7.5~8.5 酵母菌： pH 3.8~6.0 霉菌：pH 4.0~5.8 藻类： pH 6.0~7.0 原生动物： pH 6.0~8.0 初始pH 通常培养条件： 琼脂是最优良的凝固剂，自1880年代开始用于配制微生物培养基以来，至今经久不衰。 实验室的常用培养基： 细菌： 牛肉膏蛋白胨培养基； 放线菌：高氏1号合成培养基培养； 酵母菌：麦芽汁培养基； 霉菌： 查氏合成培养基； 培养基的配制 配方、配料 加热溶解 调pH(略) 过滤（略） 分装 (倒平板不分装） 灭菌 包扎(试管放在烧杯) 摆斜面、倒平板 贮存 牛肉膏蛋白胨培养基的配制 1、液体培养基 2、固体培养基 3、半固体培养基 牛肉膏蛋白胨固体培养基配方(P.64)： 牛肉膏 0.3g 蛋白胨 1g 氯化钠 0.5g