第四章细胞融合及其应用资料.ppt

仙台病毒也叫日本血凝病毒，属于RNA病毒 HVJ（Hemagglutinating virus of Jap－an的缩写）， 一个个体中如果存在两个以上的染色体数目或组成不同的细胞群时这个个体就称为嵌合体. 具有二个以上细胞核的原生质团，又称多核细胞或共浆体。 异核体：同一营养体中出现两种或两种以上遗传物质不同的细胞核。 同核体：同源原生质体的融合体 l??? 3）异核体：非同源的原生质体的融合体 l??? 4）多核体：含有双亲不同比例核物质的融合体 l??? 5）异胞质体：具有不同胞质来源的杂合细胞。 l??? 6）核质体：有细胞核而带有少量细胞质的亚原生质体 杂种细胞的筛选方法有：①细胞系互补的选择方法，包括叶绿素缺失互补、营养缺陷互补和抗性互补等；②利用物理特异性差异的选择方法：这是利用两个原生质体物理特异性差异的一种选择，包括原生质体的大小、颜色、浮密度等的不同来选择；③利用生长特异性差异的选择方法。需要注意的是上述选择方法只适合部分杂交细胞的情况，有时无法选择，就不加选择地进行培养和再生成植株，然后对再生植株的杂种性状进行鉴定。杂种细胞培养方法与原生质体的培养方法相似。 大豆和水稻原生质体融合，水稻原生质体耐37度高温，将融合后的杂种细胞培养在适合大豆原生质体生长的培养基上，温度为37度，利用h3标记T，证明杂种细胞能正常合成DNA. 西方第一部科幻小说《弗兰肯斯坦，或现代的普罗米修斯》（ 又译《科学怪人》，作者是诗人雪莱的夫人玛丽·雪莱），不仅在1910 、1915 和1931 年三次被拍成电影，逐渐形成了“弗兰肯斯坦怪物”这样的术语（意思是创造怪物的人最终受到怪物的伤害）， 2001，中山医科大学陈系古教授等人将人的皮肤细胞与兔子卵母细胞结合克隆出１００多枚人胚的成果，称这是“国际首例”，标志着“中国在治疗性克隆领域获得重大突破并走在国际前沿”。 稳定突变体 突变体细胞融合 杂种细胞测定 每天光照10 h，光强40 μmol．m-2．s-1温度25℃。 不同融合克隆早期（5个月时）形成的幼叶形态各异，不同于双亲。后期（8～10个月）新分化的植株表形有的介于双亲之间或不同于双亲（图1(b),(c)），有的形态像葡萄（图1(d)），未出现与柴胡类似的再生植株. 目前成功的4例科间体细胞杂交中，均发现再生植株染色体数目远远低于双亲之和［2～5］，甚至低于受体一方［2］的现象。 本实验再次证明了远缘杂交中以染色体消减来降低双亲的遗传物质的不平衡是杂种愈伤组织再生植株的前提条件之一［1］。从6号和18号克隆得到了表型完全像葡萄的杂种植株，由于葡萄可以靠扦插进行繁殖，因而这些杂种植株长大后可望应用于改进葡萄种质的育种研究. 融合再生的19个细胞系在早期（5个月左右），无论是对称还是不对称融合产生的克隆，其染色体数目无明显差别，90%左右分布在21～50之间，其再生幼叶基部染色体数目70%在20～48之间（图2(a)）。8个月以后，检查后期再生完整植株的愈伤组织及幼叶基部发现，染色体数目明显减少，90%以上分布在18～28之间（图2(b)）. 结果表明，所测试材料均具有双亲的特征序列(图3(b)), 有的还有与双亲不同的序列。 随着国家载人航天项目神舟四号飞船的成功发射和顺利返回, 2003年1月10日 其携带的植物细胞--烟草(黄花品种)叶肉原生质体与烟草(革新一号)叶肉细胞脱液泡原生质体空间电融合实验获得成功. 细胞核染色的结果显示, 空间飞行样品中双核细胞的比率为18.8％, 多核细胞的比率为2.1％, 分别比地面对照样品(1.65％和0.34％)增加10.4和5.2倍. 细胞活力为53.1％, 地面对照细胞的活力为38.0％, 相对提高了39.7％. 同时, 微重力环境中融合细胞的代谢活动也发生了显著的改变. 此次实验的成功表明空间微重力环境是改善细胞电融合技术的重要途径.  * 文献解读 文献解读 文献解读 （7）McAB的大量制备 文献解读 （8）单克隆抗体的鉴定 文献解读 4、单克隆抗体的应用 4.1 病毒性疾病的诊断和治疗： 可检测多种病毒中非常细微的株间差异，鉴定细菌的种型和亚种。诊断异常准确，误诊率大大降低。 例如，抗乙型肝炎病毒表面抗原（HBsAg）的单克隆抗体，灵敏度比当前最佳的抗血清还要高100倍，能检测出抗血清的60％的假阴性。 4.2 癌症治疗 可检查出尚无临床表现的极小肿瘤病灶，检测心肌梗死的部位和面积。 人们正在研究“生物导弹”——单克隆抗体作载体携带药物，使药物准确地到达癌细胞，以避免化疗或放射疗法把正常细胞与癌细胞一同杀死的副作用。在人体扫描图技术和肿瘤定位方面已获得很大进展。 4.