检验理论与应用幻灯资料.ppt

位置 20外显子 野生型 突变型 7 S L 8 V L 9和10之间 没有变化 插入NPG 插入SVQ 插入G 10 N T 29 T M 位置 21外显子 野生型 突变型 3 N S 16 A T 23 K R 35 L R 38 L Q 40 G D EGFR基因检测临床意义 结论 1 只有K-ras野生型患者才建议接受EGFR抑制剂（如西妥昔单抗和帕尼单抗）治疗。 2 吉非替尼（易瑞沙）是第一个用于治疗非小细胞肺癌的分子靶向药物， 但只对绝大多数携带EGFR基因突变的病人疗效显著。 测序在乙肝诊断上应用 测序可对乙型肝炎病毒进行基因分型 1 HBV的A或B基因型患者较C或D基因型患者对干扰素（IFN）α的应答更好。 2 HBV的C基因型与较重的肝脏病变相关，B型则与较轻的病变相关；A型与慢性肝炎相关，D型与急性自限型肝炎相关。有助于判断预后。 HBV DNA 耐药P区测序 原理：HBV DNA至少含有4个开放读码框(ORF)，即S区、C区、P区和X区，其中不同抗病毒药物应用后发生的耐药变异主要集中于DNA多聚酶的P区, 但变异位点不同。 检测靶点 耐药突变位点检测（包括拉米夫定、阿德福韦、恩替卡韦和替比夫定） 拉米夫定（5个突变点）：rtV173L、rtL180M、rtM204I/V/S、rtV207I/L/G、rtS213/T 阿德福韦（6个突变点）：rtA181V/T/S、rtV214A、rtQ215S、rtN236T、rtP237H、rtN/H238T/D 恩替卡韦（4个突变点）：rtT184A/G/I/S、rtS202G/I、rtM204I/V/S、rtM250V/L 替比夫定 （2个突变点）：rtL180M、rtM204I/V/S 分子生物学是当前生命科学中发展最快并正在与其他学科广泛交叉与渗透的重要前沿领域。近年来分子生物学理论和技术不断应用于临床，特别是在疾病的临床诊断上发挥了重要的作用，并显示出了无限的潜力。 由于分子诊断技术的飞速发展，使临床检验诊断学拓宽了领域，也得到了飞速发展。 人有了知识，就会具备各种分析能力， 明辨是非的能力。 所以我们要勤恳读书，广泛阅读， 古人说“书中自有黄金屋。 ”通过阅读科技书籍，我们能丰富知识， 培养逻辑思维能力； 通过阅读文学作品，我们能提高文学鉴赏水平， 培养文学情趣； 通过阅读报刊，我们能增长见识，扩大自己的知识面。 有许多书籍还能培养我们的道德情操， 给我们巨大的精神力量， 鼓舞我们前进。 * Introducing a product that uses the latest technology in flow cytometry for rSSO typing. Based on Luminex platform which uses color coded microspheres for multiplex analyses. * LABType? SSO技术的特点 特异性位点扩增及最新的探针设计 可在同一块板同时扩增HLA-A,B,DR位点 降低非特异性扩增导致的反应信号 改善传统SSO技术的精确度, 将模棱两可率降到了1% 同一PCR扩增条件适用于所有位点 DNA浓度的可接受范围：10-200ng/μL 所有试剂不需要预先孵育（pre-incubation) 每次扩增96份标本 扩增时间90分钟 扩增后每处理96份标本时间90分钟（1个人） 扩增后标本可在4℃冰箱内储存72小时 标本可以重新测定 不需要制胶及电泳, 避免接触有毒物质 计算机分析结果 ，大大降低了人为误差 LABType? SSO技术的特点 多元化分析——在一个反应体系完成全部反应 无需试纸条或杂交膜 适于处理大样本分型，同时也适于小样本 自动读取数据和分析结果，降低人为误差 高效、准确和低成本 LABType? SSO技术的特点 LABType? SSO技术的原理 包被了探针的微球示意图 96孔读板 示意图 2. 变性、中和 3. 杂交 4. 标记 1. 扩增 三、 群体反应性抗体（PRA）检测及其方法 淋巴细胞 患者血清 ↓ ↓ 已知抗原 + 特异抗体 补体 细胞溶解 判断患者的免疫状态及HLA 抗体的特异性。 组织器官移植的常用检测项目 组织器官移植的常用检测项目 四、细胞色素P450酶系3A亚家族中CYP3A5 基因检测 CYP3A5基因多态性 CYP3A5 *1/*1和*1/*3型患者早期要达到目标血