天然药物化学糖和苷_new资料.ppt

八、糖的鉴定和糖链结构的测定 3．气相层析 将糖制备成三甲基硅醚（增加其挥发性） 将醛糖用NaBH4还原成多元醇（避免形成端基异构体）制成乙酰化物或三氟乙酰化物。 4．液相色谱 填充材料——化学修饰的硅胶 优：不必制备成衍生物。 适合分析对热不稳定、不挥发的低聚糖和多糖。 分析单糖和低聚糖，其灵敏度不及气相层析。 八、糖的鉴定和糖链结构的测定 5．离子交换层析 糖的硼酸络合物——可进行离子交换层析 优：不必制成衍生物，而直接用水溶液进行分离（与气相比较） 糖自动分析仪： 显 色：3,5-二羟基甲苯-浓硫酸 波 长：425nm 上样量：每种组成不超过1mg 洗脱剂：四硼酸钾的缓冲溶液 八、糖的鉴定和糖链结构的测定 ㈡ 糖链结构的测定 主要解决的问题——单糖的组成、糖之间的连接位置和顺序、苷键构型 1．单糖的组成 2．单糖之间连接位置的决定 3．糖链连接顺序的决定 4．苷键构型的决定 5．13C-NMR在糖链结构测定中的应用 八、糖的鉴定和糖链结构的测定 1．单糖的组成 低聚糖、多糖的结构分析，首先要了解由哪些单糖所组成，各种单糖之间的比例如何。 一般是将苷键全水解，用PC检出单糖的种类，经显色后用薄层扫描仪求得各种糖的分子比。 也可用GLC或HPLC对单糖定性定量。 GLC常以甘露醇或肌醇为内标，用已知单糖作标准。 八、糖的鉴定和糖链结构的测定 2．单糖之间连接位置的决定 ①将糖链全甲基化→水解→甲基化单糖的定性和定量（气相层析） （甲基化单糖中游离-OH的部位就是连接位置） ②13C-NMR测定：主要归属各碳信号，以确定产生苷化位移的碳。 八、糖的鉴定和糖链结构的测定 3．糖链连接顺序的决定 ①缓和水解法：将糖链水解成较小的片段，然后分析这些低聚糖的连接顺序。 ②质谱分析。 4．苷键构型的决定 ⑴分子旋光差（klyne法） ⑵酶催化水解方法 ⑶1H-NMR判断糖苷键的相对构型 ⑷其它 八、糖的鉴定和糖链结构的测定 ⑶ 1H-NMR判断糖苷键的相对构型 在糖的1H-NMR中： 端基质子——δ5.0 ppm左右 其它质子——δ3.5~4.5 ppm 可通过C1-H与C2-H的偶合常数，来判断苷键的构型（α、β） 例如：D-葡萄糖 八、糖的鉴定和糖链结构的测定 D-葡萄糖 八、糖的鉴定和糖链结构的测定 用1H-NMR可判断一些糖的相对构型，但还有一些糖由于其结构上的原因，而无法利用1H-NMR来判断相对构型。如： 八、糖的鉴定和糖链结构的测定 再如： ⑷其它 IR——α葡萄糖苷在770、780 cm-1有强吸收峰； MS——葡萄糖苷乙酰化物331碎片峰强度：α β 八、糖的鉴定和糖链结构的测定 5．13C-NMR在糖链结构测定中的应用 端基碳——δ97~106 ppm 一般在13C-NMR谱中： 如：D-葡萄糖 八、糖的鉴定和糖链结构的测定 D-葡萄糖苷 C1——α型 97~101 ppm β型 103~106 ppm CH-OH (C2、C3、C4) 70~85 ppm CH2-OH (C6) 62 左右 CH3 20 ppm 用门控去偶技术，可判断呋喃糖的端基碳与端基质子的偶合常数。 α苷键JC-H≈170Hz β苷键JC-H≈160Hz 八、糖的鉴定和糖链结构的测定 苷化位移（glycosidation shift） 糖苷化后，端基碳和苷元α-C化学位移值均向低场移动，而邻碳稍向高场移动（偶而也有向低场移动的），对其余碳的影响不大，这种苷化前后的化学变化，称苷化位移。 八、糖的鉴定和糖链结构的测定 苷元β位有取代时的苷化位移： ①苷元α-碳手性和糖端基手性都为R（或S）时，苷化位移值与苷元为?位无取代的环醇相同。 如： 八、糖的鉴定和糖链结构的测定 ②苷元α-碳和糖端基碳手性不同时，端基碳和α-碳的苷化位移值比苷元为β-无取代的相应碳的苷化位移值大约为3.5ppm。 八、糖的鉴定和糖链结构的测定 酯苷、酚苷的苷化位移： 当糖与-OH形成酯苷键或酚苷键时，其苷化位移值较特殊，端基碳和苷