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2、操作过程 取材：在组培室中剪取1.5-2.0cm长的带顶芽的茎段，余下部分可作继代扩繁培养。 生长素处理：所剪取茎段的基部在一定浓度的生长素蘸过后，轻轻插入滤纸桥中，放入棚内有一定营养液的的长方形容器内，然后启动调控措施。 保养：在操作过程当中，要对茎段不时的喷水雾以防止失水过多而萎蔫，通过观察茎段的生根情况，并根据所出现的情况及时调整光强，温度、湿度，筛选出最佳的生根条件。 （4）小植株的驯化和移栽 日光锻炼，恢复叶绿体光合作用 湿度锻炼，打开培养瓶1~2周 冲洗干净培养基 选择基质 保湿，移栽10天内空气相对湿度应在80%~90% 注意事项 在培养中，如果出现杂菌污染，应立即将该培养物倒掉。对于愈伤组织或试管苗长势良好，仅有局部杂菌污染的试管或三角瓶，也可在无菌条件下，将愈伤组织或试管苗取出，重新放入装有相应培养基的试管或三角瓶中，继续培养。 炼苗后，也可先将试管苗浸泡在含有生长素的清水中1-2h，再移栽到驯化苗圃中。 在驯化过程中，要注意防止各种病虫害的发生。 芦荟 芦荟 在二战中，美国在日本的长崎和广岛投下两颗原子弹后，大量的幸存者被原子同位素核辐射灼伤。任何药物都医治无效，医学专家也没切实可行治疗方案，后来有人提议用芦荟绞汁抹于伤口，并开始了试用，惊人的奇迹出现，伤口竟愈合的又快又好，比其他药物再生速度要快２倍以上，甚至不留痕迹。 素有“万应良药”、“天然美容师”、“家庭医生”等美称 美容、药用的芦荟种类 库拉索芦荟、巴巴多斯芦荟，俗称美国芦荟 元江芦荟 树芦荟 好望角芦荟 华芦荟 皂质芦荟 芦荟的用途 用于风湿症、体内外各种溃疡、高血压、糖尿病、癌症、胆固醇疾病等患者。 芦荟中的脂肪酸可以有效地防治皮肤病症，因此在治疗烧伤、割伤、擦伤、皮肤病、伤疤等具有显著的疗效 芦荟可以促进皮肤细胞更新。芦荟对皮肤的渗透性强(可深达七层细胞组织) ，广泛用于化妆品和保健品等。 芦荟可以有效地清体内自由基， 排除体内有害物质，促进新陈代谢。 芦荟组织培养快速繁殖技术 芦荟不能自花授粉结实，用种子繁殖非常困难。 繁殖方法主要是分株和分蘖，难以快速、大量地繁殖种苗 对芦荟茎尖进行组织培养快速繁殖试管苗，可在短期内繁殖上百万株的种苗，成本低，效益高 材料和培养基 l0-l5cm高的芦荟幼苗 愈伤组织诱导培养基为MS+(1-6mg/ )BA+(0.1一0.5mg/L)NAA 分化培养基为MS+(2-4mg/L)BA+ (0.1-0.5mg/L)NAA 生根培养基为MS+(0.1一0.5mg/L)IBA+(2一5mg/L)PP33 1、诱导愈伤组织 芦荟幼苗在清水中冲洗，取茎尖部分，再冲洗1-2次，淋干。 在超净台上，先用75%的乙醇将茎尖浸泡30-60s，再用升汞浸5-l0min，最后用无菌水冲洗数次。 用解剖刀取出包括茎尖生长点的组织切块，接种到愈伤组织诱导培养基上。 光照 10-12h，光照度为 1000一2000Lx，温度(25士)2℃。15-25d后，外植体膨大，形成愈伤组织。 愈伤组织形成1周后，就可将愈伤组织转管进行继代培养或分化培养。 2、继代培养 无菌水反复清洗附着于愈伤组织的培养基 将愈伤块切成数个小块，再接种到装有愈伤组织诱导培养基的三角瓶中，在相同的培养条件下继续培养。 通过继代培养，可繁殖出大量愈伤组织来，用于分化培养。 3、分化培养 将愈伤组织用无菌水洗净，切成小块，接种到分化培养基中。 30-50d后，愈伤组织就可分化出芽，并继续长出小叶片。 4、生根培养 幼苗叶片长到3cm左右时，将幼苗放入装有生根培养基的三角瓶中培养。 大约半个月后，幼苗即可生根。 5、炼苗 当幼苗的根长到一 定长度，幼苗形体已显健壮时。 将幼苗取出，在清水中洗除附着在根上的培养基(注意:一定要严格洗净，否则会烂根)。 将洗净的幼苗排好，用清水喷湿，在15-25℃、湿度60%- 80%的条件下炼苗24h 6、移栽 炼苗后，将幼苗移栽入由蛭石组成的驯化苗圃中驯化，每天定期给幼苗喷施驯化培养液和清水，大约15-20d后，视幼苗长势，即可移栽到苗圃中。 注意事项 芦荟的虫害主要是红蜘蛛和蚜虫，可喷施40%的氧化乐果乳油1200倍液防治。 芦荟的病害主要是黑斑病，可喷施50%多菌灵可湿性粉剂1000倍液防治。 及时排除田间积水，控制土壤温度，消除低温高湿、高温高湿，及时清除杂草 第二节 快繁中的常见问题 物种的局限 无性系变异 培养物污染（外植体灭菌和环境消毒） 玻璃化现象（细胞分裂素浓度过高，培养温度过高、光照不足、乙烯合成过多） 褐化（酚类物质被氧化为醌类） 黄化（铁盐含量不足等原因） 第三节 离体快繁的应用 用于稀缺或者急需良种植物的繁殖[ ] 用于脱毒苗的快速繁殖 雌雄异株植物、三倍体、单倍体以及基因工程植株