第五章 转基因食品的检测和分析 转基因食品与安全课件.ppt

（二）RT－PCR RT-PCR 为反转录RCR或实时PCR共同的缩写，是聚合酶链式反应（PCR）的一种广泛应用的变形。在RT-PCR中，一条RNA链被逆转录成为互补DNA，再以此为模板通过PCR进行DNA扩增。 二、翻译水平的检测 可以检测具有抗原性蛋白类表达产物的存在。 （一）免疫检测技术 1. Western杂交 是将蛋白质电泳、印迹、免疫测定融为一体的特异蛋白测定法。 从转基因植物中提取总蛋白质，经纯化处理后，进行SDS(十二烷基磺酸钠)聚丙烯酰胺凝胶电泳使蛋白质按分子量大小分离，将凝胶上的蛋白质转移到膜上，按特定的程序与抗体杂交，对杂交结果进行检测便可得知被检植物组织内目的蛋白表达与否及其表达量。 Western杂交 加入特异性抗体（一抗），膜上的目的蛋白（抗原）与一抗结合后，再加入能与一抗结合的带标记的二抗，最后通过二抗上带标记化合物（一般为辣根过氧化物酶）的特异性反应进行检测。 抗体（Antibody，Ab）： 是高等动物体在抗原刺激下产生的一类 能与抗原特异结合的活性物质。 抗体具有双重性（它既是抗体又是抗原），即抗体又可以作为抗原。 一种抗体作为抗原刺激机体产生的新抗体叫抗抗体。 Western 杂交 提取待测样品蛋白质 SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳分离