激光微孔猪脱细胞真皮基质修复创面的实验与临床研究.pdfVIP

激光微孔猪脱细胞真皮基质修复创面的实验与临床研究 梁黎明，柴家科，杨红明，宋慧锋，京萨，冯瑞 (解放军总医院第一附属医院烧伤整形科北京市100037) 本课题受国家公益性行业专项科研基金(200802066)、北京市科委计划研发攻关项目 大项目(2002．35)的联合资助，谨致谢忱! “激光微孔猪去细胞真皮基质及其制备方法和应用”获得国家发明专利，批准年份：2009 年，专利号：ZL20061 0090085．2。 本课题部分内容己形成论文发表于Bums，2007，33(6)：719．725． 本课题纳入2008年北京市科学技术一等奖。 作者简介：梁黎明，男，1975年生，医学博士，现任解放军总医院第一附属医院烧伤整 形外科副主任医师。 【摘要l 目的探讨激光微孔猪脱细胞真皮基质(PADM)与自体薄皮片修复全层皮肤缺 损创面，提高创面修复质量的可行性。方法采用胰蛋白酶／TritonX一100的方法制备 PADM，使用激光力n-r．机对其进行打孔，根据微孔孔间距的不同，制备出四种不同规格的 激光微孔真皮基质。144只SD大鼠背部制作全层皮肤缺损创面，随机分为6组：微孔组 自体刃厚皮移植；网状组采用网状PADM+自体刃厚皮移植；对照组采用单纯自体刃厚皮 移植。术后定期观察各组创面愈合情况并计算移植物成活率和创面收缩率，同时行组织学 观察。将激光微孔PADM与自体薄皮片复合移植应用于临床，修复切除瘢痕后继发创面9 例，并采用网状PADM与自体薄皮片复合移植、单纯自体薄皮片移植进行自身对照。结 果微孔组I、II术后6周移植物成活率与对照组差异无统计学意义，但明显高于网状组。 微孔组III、Ⅳ术后4、6周移植物成活率均低于网状组和对照组。微孔组I、II术后4、6 周创面收缩率较对照组显著降低，且术后6周较网状组亦显著降低。组织学观察显示各微 孔组上皮化良好，胶原纤维排列整齐，基底膜结构完整。临床应用的9名患者中，5例患 者各组复合皮均全部成活；4例患者激光微孔PADM移植区成活良好，网状PADM移植 区局部可见水疱或表皮松动，经换药后愈合。组织学观察：激光微孔PADM移植区表皮、 真皮结构基本正常，表皮钉突密集，真皮层胶原纤维排列规整，毛细血管结构丰富，未见 皮肤附件；网状PADM移植区表皮、真皮结构接近正常，表皮钉突散在；单纯自体薄皮 灯移植区表皮层分层接近正常，钉突稀少。结论与网状PAMD相比较，激光微孔PADM 在移植物成活率及组织结构上更有优势，可提高进一步创面修复质量。 【关键词】猪脱细胞真皮基质；激光；微孔；自体皮；复合移植 各种原因造成的全层皮肤缺损，由于创面缺乏真皮基质，愈合后常遗留瘢痕增生和挛 缩畸形，严重影响外观和功能。网状异种(猪)脱细胞真皮基质与自体刃厚皮复合移植修 复全层皮肤缺损己在临床成功应用，但该替代物真皮基质分布欠均匀，远期仍出现一定程 度的收缩，修复效果并不十分理想。我们采用激光打孔技术对猪脱细胞真皮基质(porcine acellulardermis 自体刃厚皮复合移植用于修复全层皮肤缺损创面，动物实验与临床应用均取得了满意的效 果。 1材料和方法 1．1 水浴恒温震荡器(上海医疗器械厂)。 1．2激光微孔PADM的制备取50kg左右无皮肤疾病的健康白色家猪，活杀后剃毛，剥 微孔周边变性组织，PBS充分浸泡洗涤，袋装密封，60Co照射消毒，4℃保存备用。 自体刃厚皮移植；微孔组Ⅳ：孔间距为1．5mm的PADM+自体刃厚皮移植；网状组：网状 自体刃厚皮移植。创面移植后用凡士林纱布及无菌敷料覆盖，打包固定。实验鼠术后单笼 饲养。2周后换药。 1．4创面愈合情况的大体观察手术后2、4、6周动态观察植皮成活情况并计算移植物 成活率和创面收缩率，同时观察创面的质地、弹性。移植物成活率=植皮成活面积／移植 总面积×100％。创面收缩率=(移植面积一检测时面积)／移植面积×100％(皮片面积用透 明胶片网格法测定)。 1．5组织学观察每组于术后2、4、6周各处死8只大鼠，于创面愈合处取标本，常规 制成石蜡切片，分别行苏木素．伊红(HE)染色和兔抗人Laminin抗体免疫组化染色，光 镜下观察组织学变化。 1．6临床资料在患者及家属知情同意、医院伦理委员会批准的前提下，自2005年9月～ 2008年12月，使用自行研制的激光微孔PADM与自体薄皮片复合移植，治疗增生性瘢痕 2