番茄果实特异性启动子的克隆及遗传转化的研究.pdfVIP

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2016-05-12 发布于安徽
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番茄果实特异性启动子的克隆及遗传转化的研究.pdf

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生物技术通报 ·研究报告· BIOTECHNOLOGY BULLETIN 年第期 2012 1 番茄果实特异性启动子的克隆与遗传转化研究 1,2,3 1,2 4 1,2 1,2 1,2 姜娜娜赵传志赵光敬李长生夏晗王兴军 1 （山东省农业科学院高新技术研究中心山东省作物与畜禽品种改良生物技术重点实验室，济南 250100 ； 2 3 农业部黄淮海作物遗传改良与生物技术重点开放实验室，济南 250100 ；山东现代职业学院，济南 250100 ； 4 山东省青州市实验中学，青州 262500） - 摘要：为了实现外源基因在番茄果实中的高效和特异表达，克隆了番茄果实特异基因多聚半乳糖醛酸酶基因（Poly galacturonase ，PG ）的启动子。以中蔬四号番茄为材料，建立并优化了以子叶为外植体的番茄高效再生和遗传转化体系；以GUS 为报告基因，构建 PG GUS 植物表达载体，转化番茄。结果表明，在 1.0 mg/L ZT 的 MS 分化培养中，番茄子叶的发芽率最高，芽的诱导率高达 91% ，且发生畸态芽和褐化的外植体最少；通过抗生素浓度对农杆菌的抑制效果试验发现，当头孢霉素的浓度为 200 mg/L 时，抑制农杆菌的效果最好；成功克隆了番茄 PG 启动子，将 PG 启动子驱动的 GUS 基因转入番茄，对转基因后代果实的 GUS 染色表明，PG 启动子驱动的外源基因在果实中特异表达。关键词：番茄多聚半乳糖醛酸酶果实特异启动子遗传转化体系 - Fruit specific Promoter Cloning and Tomato Transformation 1,2,3 1,2 4 1,2 1,2 1,2 Jiang Nana Zhao Chuanzhi Zhao Guangjing Li Changsheng Xia Han Wang Xingjun 1 - （High Tech Research Center, Shandong Academy of Agricultural Sciences, Key Laboratory for Genetic Improvement of Crop Animal and Poultry of 2Key Laboratory of Crop Ge