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生物技术通报
BIO TE CHN OLOG Y B ULLETIN 20 11 1
1010
程抒劼 黄仕杰 郭丽琼 韩飞 林俊芳
( , 510640)
: 对中国重要药用植物南方红豆杉中的 10去乙 巴卡亭10乙 转移酶 ( DBAT) 基因进行分离测序以及生
物信息学分析根据 GenBank 中已登录的 10去乙 巴卡亭10乙 转移酶 ( DBAT )基因 cDNA 序列设计 引物, 采用 RT
PCR 技术从南方红豆杉叶片中克隆了 1 个DBAT 基因 T cDBAT 的全长 cDNA结果显示, T cDBAT cDNA含有 1 个1 323 bp
的开放阅读框 ( open read in fram e, ORF), 编码 440 个氨基酸, 对应基因组序列含有 1 个内含子T cDBAT蛋白 N 端含有 5 个
N 基化作用位点和 2 个保守的 N糖基化作用位点, 具有 1 个保守的 B i 1结构域, 多 个重要的磷酸化位点以及 1 个类似钙
结合蛋白重复结构序列同源性比较系统发生分析以及蛋白质高级结构预测均表明, T cDBAT 属于转移酶超家族( transfer
ase superfam ily), 是一 个具有乙 转移酶活性的功能蛋白, 能够催化 10去乙 巴卡亭 ( 10DAB) 10位的乙 化, 从而生成抗
癌新药紫杉醇生物合成途径中的最后一 个双萜中间体 巴卡亭有望通过成功克隆和鉴定紫杉醇生物合成途径中的关
键酶基因达到提高其半合成前体巴卡亭产量的目的, 并且为进一步利用组合表达系统商业化生产紫杉醇奠定基础
: 南方红豆杉 紫杉醇 10去乙 巴卡亭10乙 转移酶 基因克隆 生物信息学分析
Cloning and SequenceAnalysis of10Deacetylbaccatin
10OAcetylTransferaseGene from Taxus chinensis var.ma irei
Chen Shujie Huan Shijie Guo L iqion H an Fei Lin Junfan
(College of Food Science, Institute of B iomass Energy, South ChinaAgricultural University, Guangzhou 510640)
Abstrac:t It ami ed at isolatin and b ioin form atics analyz in the ene encod in a 10deacetylbaccatin 10O acetyl transfer
ase( DBAT) in axus ch inensis var. m airei, am edicinal plant of the Chinese endem ic enera. By usin the prmi ers wh ich w ere desi ned
accordin to the cDNA sequence deposited in the GenBank database, an RTPCR clon in strate y was em ployed to am plify a fu lllen th
cDNA ( desi nated as T cDBAT) . The tem plate of this amp lication was the total RNA isolated from leaves of axus chinensis var.
m airei. T cDBAT has an open read in fram e ( ORF) of 1 323 bp correspond in to a deduced protein of 440 residues and one intron w as
found in the enom ic sequence. T cDBAT
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