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生物技术通报
· · BIOTECHNOLOGY B ULLETIN 20 10 7
研究报告 年第 期
小分子RNA 表达载体构建的新方法———
MicroRNA 前体PCR 置换法
陈锐 胡正 张辉
( ， 100081)
中国农业科学院作物科学研究所国家农作物基因资源与基因改良重大科学工程 北京
: MicroRNA (miRNA) 、 RNA 。miRNA
摘 要 基因的终产物是进化上高度保守的 具有基因表达调控功能的非编码小分子
(pre-miRNAs) ， AGO (RISC) 。 pre-
的特征性发卡环前体 在体内经数步加工后 与 蛋白构成沉默复合体 以行使其功能 如将已知
miRNAs miRNA (miRNA* ) RNA ， ，
上的 成熟链和互补链 分别置换为有待研究的小分子 并构建表达载体转化植株 利用转化株
miRNA ， RNA 。 miRNA ， PCR ，
内源的 成熟加工体系 可以产生预设的小分子 利用已知拟南芥 前体为模板 使用替换 的方法 人
工构建了gso8-ap-miRNA-pBI121 。 ， T 。
表达载体 利用农杆菌介导法转化拟南芥 多数 代植株表现出提早开花的突变表型 该
1
、 RNA 。
方法是一种简便 高效的构建小分子 表达载体的方法
: RNA MicroRNA PCR
关键词 小分子 置换法
A Novel Method for Constructing Small RNA Expression
Vector———Artificial pre-MircoRNA
Chen Rui Hu Zheng Zhang Hui
(Crop Sciences Institute ，Chinese Academy of Agricultural Sciences ，National Key Facility f or Crop
Gene Resources and Genetic Imp
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