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生物技术通报
·研究报告· BIOTECHNOLOGY BULLETIN 年第 期
2013 8
山葡萄转录因子 CBF1 基因的克隆及序列分析
1，2 2
刘洋 孙佳帝
（1. 吉林农业大学，长春 130118 ；2. 长春职业技术学院，长春 130033）
摘 要 ： 采用生物信息学方法比对多种低温诱导植物的CBF1 同源基因，在其保守区域设计一对兼并引物，在特殊的RT-
PCR 条件下，结合反向PCR 技术对山葡萄低温诱导转录因子CBF1 的全长基因进行了克隆，经测序和序列分析显示，山葡萄转录
因子CBF1 基因ORF 长为753 bp ，无内含子，编码251 个氨基酸，编码蛋白分子量和等电点分别为27.503 kD 和3.11，属酸性蛋白质。
应用Blast 软件将山葡萄转录因子 基因与大麦 （ ）、水稻 （ ）等10 种植物 基因氨基酸序列
CBF1 Hordeum vulquare Oryza sativa CBF1
比较同源性达到80.7% ，且在AP2/EREBP 结构域有高度的保守性，表明已成功克隆山葡萄 （ ）转录因子 基因，
Vitis amurensis CBF1
将其命名为ViCBF1 ，在GenBank 上的登录号为DQ517296。
关键词 ： 山葡萄 （ ） 低温诱导 转录因子 基因 基因 克隆
Vitis amurensis CBF1 COR
Cloning and Sequence Analysis of CBF1 Gene in Vitis amurensis
Liu Yang1，2 Sun Jiadi2
（1. Agriculture University of Jilin ，Changchun 130 118 ；2. Changchun Vocational Institute of Technology ，Changchun 130033 ）
Abstract: Bioinformatic method was used for the comparative analysis of CBF1 gene sequences in cold acclimation, conservative domains
among the sequences were determined for degenerate primer designing, the defined PCR conditions and Reverse PCR clone were adopted to
clone the full length CBF
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