CUP1为筛选标记的酿酒酵母整合型多基因表达载体的构建.pdfVIP

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2016-11-15 发布于安徽
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CUP1为筛选标记的酿酒酵母整合型多基因表达载体的构建.pdf

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生物技术通报 · · BIOTECHNOLOGY B ULLETIN 20 11 10 研究报告年第期 CUP1 为筛选标记的酿酒酵母整合型多基因表达载体的构建 1，2 ，3 2 2 2 2 2 阳辛凤徐林弓淑芳郭安平孔华贺立卡 1 2 ( ， 570228 ; ，海南大学农学院海口中国热带农业科学院热带生物技术研究所 3 57 110 1 ; ， 57 110 1) 海口中国热带农业科学院分析测试中心海口 : ， ; 摘要为了赋予工业酿酒酵母对淀粉和纤维素的降解活性提高酿酒酵母对粗木薯粉进行酒精发酵时的酒精产率另一，，方面为了解决工业酿酒酵母不适于使用营养缺陷型筛选标记对转化子进行筛选的问题以及避免引入抗药性标记基因带来的， CUP1 。 pYES2-PMF-rDNA ，安全性问题构建了以抗铜蛋白基因为筛选标记的酿酒酵母整合型多基因表达载体以载体为基础 CUP1 Ura- ， pYES2M。 eg3 、以新的筛选标记基因替换原有的尿嘧啶基因得到载体再顺序插入葡聚糖内切酶基因葡萄糖淀粉酶 ga1 - bgl1， CUP1 pYES2M-eg3-ga1-bgl1，基因和β 葡萄糖苷酶基因构建得到以为筛选标记的酵母整合型三价表达载体其中每个，、，。基因都具有独立而完整的表达盒包括启动子信号肽和终止子从而实现多基因单表达载体一次转化 :