建兰Actin基因cDNA全长的克隆及表达分析.pdfVIP

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2016-05-13 发布于安徽
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建兰Actin基因cDNA全长的克隆及表达分析.pdf

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生物技术通报 ·研究报告· BIOTECHNOLOGY BULLETIN 2012年第12期建兰 Actin 基因 cDNA 全长的克隆及其表达分析吴菁华吴少华杨超（福建农林大学园艺学院，福州 350002）摘要：根据单子叶植物的肌动蛋白基因（Actin ）的保守区序列设计引物，采用RT-PCR 和RACE 技术从建兰（ Cymbidium ensifolium ）中分离出Actin 基因cDNA 全长。序列分析结果表明，建兰Actin 基因长度为1 434 bp ，编码区长度为1 134 bp ，编码 377 个氨基酸，将其命名为CeActin ，GenBank 登录号为JN613147 。CeActin 推导的氨基酸序列与其他植物的同源性都较高，具有高度的保守性。采用半定量RT-PCR 技术分析CeActin 在建兰各组织及花不同发育时期的表达情况，结果表明，表达量没有明显差异，表明CeActin 基因可作为内参基因。关键词：建兰肌动蛋白基因克隆表达分析 Cloning and Expression Analysis of CeActin Homologous Gene from Cymbidium ensifolium Wu Jinghua Wu Shaohua Yang Chao （，， 350002 ） College of Horticulture Fujian Agriculture and Forestry University Fuzhou Abstract: The full-length cDNA sequence of Actin gene from the bud of Cymbidium ensifolium was cloned （GenBank accession number ：JN613147 ）by using RT-PCR and RACE with degenerate primer which were synthesized based on the high homologous region among the sequences of several monocotyledon Actin genes. The full length cDNA of CeActin was 1 434 bp with an ORF of 1 134 bp encoding a protein with 377 amino acids. Homology search showed that this gene shared high identity with other Actins. Semi-quantitative RT-PCR analysis showed that the expression of CeActin had no notable difference in different tissues and different floral development stages. The results laid basis for identificati