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生物技术通报
·研究报告· BIOTECHNOLOGY BULLETIN ( )
2015, 31 11 :179-185
毕赤酵母 GS115 中 N- 乙酰转移酶在大肠杆菌中的克隆
表达与性质研究
1,2 1,2 1,2
朱海峰 吴丹 吴敬
(1. 江南大学 食品科学与技术国家重点实验室,无锡 214122 ;2. 江南大学生物工程学院 工业生物技术教育部重点实验室江南大学,
无锡 214122)
摘 要 : 为了研究P. pastoris Mpr1 的生理特性,在E. coli JM109 胞内中成功表达来源于P. pastoris GS115 的Mpr1 酶,并利
用响应面分析法对诱导温度、IPTG 诱导浓度、起始诱导OD 进行发酵优化,酶活达到 (610.3±9.5)mU/mL。酶学性质显示,Mpr1
酶的最适反应pH 范围为7.0-7.5,最适反应温度是30℃。通过分析重组表达Mpr1 菌株和对照菌株的培养过程,显示重组菌株的
生长能力显著增强,原因是Mpr1 降低了细胞内的ROS 水平。
关键词 : N- 乙酰转移酶 ;大肠杆菌;毕赤酵母GS115 ;响应面分析法 ;发酵优化
DOI :10.13560/ki.biotech.bull.1985.2015.11.023
,
Cloning Expression and Characterization of Enzyme for Mpr1 from
P. pastoris GS115 in Recombinant E.coli
Zhu Haifeng1,2 Wu Dan1,2 Wu Jing1,2
(1. State Key Laboratory of Food Science and Technology ,Jiangnan University ,Wuxi 214122 ;2. School of Biotechnology and Key Laboratory
of Industrial Biotechnology Ministry of Education ,Jiangnan University ,Wuxi 214122 )
Abstract: Due to the nature in P. pastoris methanol metabolism, it suffers much more ROS oxidative stress. There is one Mpr1 enzyme
in P. pastoris. It plays significant physiological roles in ROS oxidative stress resistance ability and related research is still blank. For a detailed
study about the physiological characteristics of P. pastoris Mpr1, Mpr1 from P. pastoris GS115 had been successfully expressed in E.coli JM109.
Fermentation optimization of recombinant cell was studied from induction temperature, IPTG
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