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生物技术通报
·研究报告· BIOTECHNOLOGY BULLETIN 年第 期
2013 9
毕赤酵母表达重组葡萄糖氧化酶的发酵条件
王帅坤 郝杰清 王振伟 师慧 孟延发
（四川大学生命科学学院 生物资源与生态环境教育部重点实验室，成都 610064）
摘 要 ： 对甲醇诱导重组Pichia pastoris GS115 mut+ 高效表达黑曲霉葡萄糖氧化酶基因的条件进行了研究，拟建立一条高效
低成本的生产重组葡萄糖氧化酶的工艺路线。通过摇瓶试验对发酵培养基、诱导时机、pH、诱导温度、甲醇诱导浓度等进行了优化，
随后进行了50 L 发酵罐扩大化培养。结果表明，最适发酵培养基为YEPD 培养基，甲醇诱导产酶的最佳时机为菌体对数生长末期，
最佳诱导浓度为1% ，最适诱导pH 范围为6-6.5 ，最适诱导温度25 ℃。按优化的条件用50 L 发酵罐分批培养酵母 14 h ，甲醇诱导
培养48 h 后生物量和酶活性达到最高。菌体终密度达到OD600 为44 ，每升发酵液中产酶105 kU ，发酵液上清蛋白含量为1 000 mg/L。
关键词 ： 葡萄糖氧化酶 毕赤酵母 诱导表达 高密度发酵
-
Studies on Fermentation Conditions for r GOD Production
by Pichia pastoris GS115
Wang Shuaikun Hao Jieqing Wang Zhenwei Shi Hui Meng Yanfa
（ - - ， ， ， 610064 ）
Key Laboratory of Bio Resources and Eco Environment Ministry of Education College of Life Science Sichuan University Chengdu
+
Using methanol to induce the expression of glucose oxidase gene cloned in GS 115 mut
Abstract: Aspergillus niger Pichia pastoris
was deeply investigated for establishing a high-performance but low-cost method of recombinant glucose oxidase production. The medium, the
pH, the time point of induction, the
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