嗜吞噬细胞无形体msp4蛋白的生物信息学分析及其表达鉴定.pdfVIP

生物技术通报 ·研究报告· BIOTECHNOLOGY BULLETIN ( ) 2015, 31 1 :220-224 嗜吞噬细胞无形体 msp4 蛋白的生物信息学分析及 表达鉴定 赵庆亮  杨素芳  梁田  张殿卿  杨霞  盛金良 （石河子大学动物科技学院 人兽共患病实验室，石河子 832003） 摘 要 ： 分析预测嗜吞噬细胞无形体msp4 蛋白的抗原性，对嗜吞噬细胞无形体的msp4 蛋白采用生物信息学对其进行分析二 级结构，亲水性，疏水性，B 细胞线性表位；根据分析的优势抗原表位区，进行基因合成并亚克隆至pET32a 表达载体，在大肠埃 希菌中获得重组蛋白。生物信息学分析结果显示msp4 蛋白由283 个氨基酸组成，分子量为29.8 ku，理论等电点为6.05，不稳定系 数为32.79，总平均疏水性为0.063 ；二级结构预测msp4 蛋白主要以无规卷曲、延伸链、α-螺旋为主 ；B 细胞表位预测msp4 蛋白 有14 个线性表位 ；根据分析的结果选取msp4 蛋白亲水性高的膜外区的28-158 位序列克隆至pET32a 进行原核表达，在34 ku 出 有目的蛋白的表达。成功对嗜吞噬细胞无形体的msp4 蛋白原核表达及纯化，为无形体病血清学检测方法的建立奠定了物质基础。 关键词 ： 嗜吞噬细胞无形体 ；生物信息学分析 ；msp4 蛋白 ；原核表达 DOI ：10.13560/ki.biotech.bull.1985.2015.01.034 Expression and Bioinformatics Analysis of the msp4 Protein of Anaplasma Phagocytophilum Zhao Qingliang Yang Sufang Liang Tian Zhang Dianqing Yang Xia Sheng Jinliang （College of Animal Science and Technology of Shihezi University ，Shihezi 832003 ） Abstract: The purpose of this study was to analysis the antigenicity of msp4 protein of anaplamsa phagocytophilum. The informatics analysis was used to predict and analyze the important parameters of the msp4 protein, such as the physical and chemical properties, protein secondary structure, and its hydrophilicity, hydrophicity, bepipred linear epitope. According to the advantage epitope, we selected the high hydrophilic region of protein membrane outside domains, and cloned to pET32a prokaryotic expression vector. The bioinformatics analysis revealed that the msp4 protein was composed of 283 amino acids, and that its isoelectric point was 6.52. The msp4 pro