烟草胞质6-磷酸葡萄糖酸脱氢酶基因的克隆及其表达分析.pdfVIP

烟草胞质6-磷酸葡萄糖酸脱氢酶基因的克隆及其表达分析.pdf

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生物技术通报 ·研究报告· BIOTECHNOLOGY BULLETIN ( ) 2015, 31 5 :113-119 烟草胞质 6-磷酸葡萄糖酸脱氢酶基因的克隆及 表达分析 林世锋  付强  余婧  赵杰宏  任学良  王仁刚 (贵州省烟草科学研究院 烟草行业分子遗传重点实验室,贵阳 550081) 摘 要 : 采用电子克隆的方法,结合RT-PCR 和SMART RACE 技术,首次从烟草 ( )中克隆到1 个胞质 Nicotiana tabacum 6-磷酸葡萄糖酸脱氢酶 (6PGDH)基因的cDNA 序列,命名为Nt6PGDH (GenBank登录号 :KM211534)。该基因cDNA 全长1 932 bp,开放阅读框1 455 bp,编码484 个氨基酸,与番茄 ( )和马铃薯 ( )的6PGDH 氨基酸序 Solanum lycopersicum Solanum tuberosum 列一致性最高,为95%。生物信息学分析表明,Nt6PGDH 氨基酸序列不存在信号肽和转运肽,无跨膜结构域,定位于细胞质。对 烟草不同发育时期 基因的表达情况分析发现, 基因在烟草旺长期根、茎、叶中的表达量均高于苗期,并且在同 Nt6PGDH Nt6PGDH 一发育时期,烟草根中表达量最强,茎次之,叶片最弱。 关键词 : 烟草 ;胞质6-磷酸葡萄糖酸脱氢酶 ;基因克隆 ;表达分析 DOI :10.13560/ki.biotech.bull.1985.2015.05.018 - Cloning and Expression Analysis of Cytosolic 6 phosphogluconate ( ) Dehydrogenase Gene in Tobacco Nicotiana tabacum Lin Shifeng Fu Qiang Yu Jing Zhao Jiehong Ren Xueliang Wang Rengang (Key Laboratory of Molecular Genetics ,CNTC ,Guizhou Academy of Tobacco Science ,Guiyang 550081 ) Abstract: A cDNA sequence of cytosolic 6-phosphogluconate dehydrogenase(6PGDH)gene was cloned from Nicotiana tabacum by in silico cloning combined with RT-PCR and SMART RACE technologies, and designated as Nt6PGDH (Accession number KM211534).

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