聚乳酸羟基乙酸共聚物纳米粒在caco-2ht29-mtx共培养细胞模型的转运的研究.pdfVIP

药学学报 Acta Pharmaceutica Sinica 20 13, 48 ( 12): 1829 1835 ·1829 · 乳酸羟基乙酸共聚物纳米粒在Caco-2/HT29-MTX 共培养细胞模型的转运研究 1 2 1* 1 1 1 真 , 李 刚 , 林东海 , 王俊腾 , 秦利芳 , 郭桂萍 (烟台大学 1. 药学院, 2. 生命科学学院, 山东 烟台 264005) 摘要: 建立 Caco-2/HT29-MTX 共培养细胞模型, 研究不同表面化学性质的 PLGA 纳米粒在覆盖黏液层的 Caco-2/HT29-MTX 共培养细胞模型的转运能力。以聚乳酸羟基乙酸共聚物 (PLGA) 为载体材料, 通过单甲氧基 聚乙二醇 (mPEG) 及壳聚糖 (chitosan) 对其进行表面修饰, 采用纳米沉淀法制备PLGA-NPs 、mPEG-PLGA-NPs 和壳聚糖包裹的PLGA-NPs, 并测定其平均粒径及zeta 电位。以香豆 -6 (coumarin 6) 为荧光标记物, 通过激光 共聚焦显微镜观察纳米粒的转运情况; 以呋喃二烯 (FDE) 为模型药物, HPLC 测定纳米粒的转运量。通过加入内 吞阻断剂秋水仙 及诺可唑研究纳米粒的转运机制。采用免疫荧光法考察不同表面化学性质的纳米粒对细胞紧 密连接蛋白ZO-1 的影响。结果表明, 纳米粒分散均匀, PLGA-NPs 表面荷负电, 经mPEG 修饰后zeta 电位近电 中性, 壳聚糖包裹后表面荷正电。呋喃二烯的包封率均75% 。mPEG-PLGA-NPs 在Caco-2/HT29-MTX 共培养细 胞的转运能力高于PLGA-NPs 和CS-PLGA-NPs, 在秋水仙 及诺可唑作用下转运量明显降低, 并影响ZO-1 蛋白 的分布。说明PLGA-NPs 和mPEG-PLGA-NPs 可能通过胞吞作用和细胞旁路途径进行转运, CS-PLGA-NPs 主要 以胞吞作用进行转运; mPEG-PLGA-NPs 因其表面的亲水性及电荷近中性, 具有较好的抗黏性能, 能够快速穿过 黏液层到达细胞并转运。 关键词: PLGA 纳米粒; 呋喃二烯; Caco-2/HT29-MTX 共培养细胞模型; 黏液; 转运 中图分类号: R943 文献标识码: A 文章编号: 0513-4870 (20 13) 12- 1829-07 Transport of PLGA nanoparticles across Caco-2/HT29-MTX co-cultured cells 1 2 1* 1 1 1 WEN Zhen , LI Gang , LIN Dong-hai , WANG Jun-teng , QIN Li-fang , GUO Gui-ping (1. Pharmacy School, 2. Life School, Yantai University, Yant