抵抗素和糖尿病大血管并发症的关系及机制的研究.pdfVIP

抵抗素与糖尿病大血管并发症 的关系及其机制研究 摘要 研究背景与目的：糖尿病大血管并发症，即加速发生发展的动脉粥样 硬化，是糖尿病病人致残、致死的首要原因。目前认为，在糖尿病以及 糖尿病前期，多种因素加速了动脉粥样硬化病变的进展。抵抗素(resistin) 是存在于血浆中的富含半胱氨酸的分泌性蛋白。与啮齿类动物脂肪细胞 特异性分泌抵抗素不同，人体内抵抗素主要在外周血单核细胞中表达。 初步研究提示：抵抗素可能在炎症反应以及动脉粥样硬化的发病机制中 发挥作用。本课题通过测定冠状动脉造影患者血清抵抗素水平，探讨抵 抗素与冠状动脉粥样硬化的关系及其可能在糖尿病大血管并发症中所起 的作用；体外实验首先探讨抵抗素对血管内皮细胞中纤溶酶原激活物抑 制物一1(PAI—1)表达的影响及其分子机制，以探讨抵抗素在斑块发展及 并发症发生中所起的作用；同时，观察氧化型低密度脂蛋白(OX—LDL) 作用于巨噬细胞，巨噬细胞中抵抗素表达水平的改变；应用抵抗素蛋白 作用于巨噬细胞，观察细胞吞噬脂质的情况以及清道夫受体表达水平的 变化，以探讨抵抗素在巨噬细胞向泡沫细胞转化过程中的作用，从而多 方面地研究抵抗素在动脉粥样硬化发病机制中的作用。 材料与方法：在自04年9月至05年3月住院行冠状动脉造影的患者 中随机选取88例，分为单纯冠心病组、糖尿病合并冠心病组、单纯糖尿 病组以及正常对照组。受试者血清行生化检查及抵抗素、高敏c反应蛋 Northern PAI—l blot以及Westernblot检测技术研究抵抗素对HUVECs Shift Electrophoretic Mobility 检测抵抗素、氧化应激以及NF—r．B激活与PAl—l表达水平的关系。在建 立了人外周血单核细胞分离培养及诱导分化的基础上，应用荧光定量 法观察抵抗素对巨噬细胞脂质含量的改变；荧光定量PCR观测清道夫受 体SRA与CD36mRNA表达的变化：Westernblot以及流式细胞仪检测 蛋白表达水平。 结果：1)冠心病、糖尿病合并冠心病以及糖尿病患者血清抵抗素以 P=0．001)是影响血清抵抗素水平的因素：随着冠脉病变支数的增加，血 后促进PAI．1表达；10mM emodin均显著抑制抵抗素促 NAC或599／ml 使内皮细胞表达PAI．1的作用。3)50 gg／ml蛋白的OX．LDL呈时间依赖 胞内脂质荧光染色强度显著增加；抵抗素时间、剂量依赖性提高CD36 内 性 道 巨 发 病 清 AND RESISTIN OFHUMAN RELATION MACROVASCULAR DIABETIC MOLECULAR ITSPOTENTIAL AND ABSTRACT mflcrovascular and Objective：Diabetic Background diseases· cardioVascula