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刺五加叶纯化物对2型糖尿病大鼠降血糖、降血脂作用的实验研究
刺五加叶纯化物对2型糖尿病大鼠降血糖、降血脂作用的实验研究
【摘要】 目的:探索刺五加叶纯化物对2型糖尿病大鼠血糖、血脂的作用及其治病机理。方法:通过高脂饮食联合STZ诱导的方法建立2型糖尿病大鼠动物模型,给予模型大鼠不同药物及剂量,观察刺五加叶纯化物对模型大鼠血糖、血脂及抗氧化机制的影响。结果:刺五加乙醇提取物组,刺五加叶纯化物高、中剂量组及阳性药物组FBG均低于模型对照组,比较差异均有统计学意义(P中国论文网 /6/view-7254340.htm
【关键词】 刺五加叶纯化物; 2型糖尿病; 血糖; 血脂
doi:10.3969/j.issn.1674-4985.2016.05.006
糖尿病是一种以高血糖为特征的代谢性疾病,为一种终身性疾病。2015年国际糖尿病联合会(IDF)公布的新数据[1]:(1)2015年糖尿病医疗保健支出总额为6730亿美元。(2)全球有4.15亿糖尿病成年患者,3.18亿人存在患糖尿病的风险,全球三分之一的糖尿病人来自中国,成年人群中糖尿病前期(IGT)患病率为50.1%。其中2型糖尿病(T2DM)的发病率约占总发病率的90%以上,危害程度最大,可导致各种组织,特别是眼、肾、心脏、血管、神经的慢性损害及功能障碍[2]。因此,如何预防和治疗T2DM及其并发症已成为世界各国药学研究者面临的严峻挑战和艰巨任务。本实验通过高脂饮食联合STZ诱导的方法建立2型糖尿病大鼠动物模型,考察刺五加叶纯化物对模型大鼠血糖、血脂及抗氧化机制的影响,测定相关生理生化指标,为探讨其治病机理提供实验基础和指导,现报道如下。
1 材料与方法
1.1 实验材料
1.1.1 药品与试剂 刺五加叶纯化物实验室自制,参芪降糖胶囊(批准文号:国药准字河南羚锐制药股份有限公司),链脲佐菌素STZ(批号:110610,美国Sigma公司),血糖试纸(批号:470713,德国罗氏诊断有限公司),10%水合氯酸(批号上海国药集团)。总胆固醇测定试剂盒(CHO,南京建成生物公司,批号,甘油三脂测定试剂盒(TG,南京建成生物公司,批号,超氧化物歧化酶SOD试剂盒(批号:201503136,南京建成生物公司),丙二醛MDA测定试剂盒(批号南京建成生物公司),其余试剂为国产分析纯。
1.1.2 实验动物 SPF级SD大鼠,雄性,180~220 g,购自黑龙江中医药大学实验动物中心,动物合格证号:SCXK黑2008-0002。
1.1.3 饲料 基础词料(SPF级):玉米、小麦、豆粉、进口鱼粉等。高糖高脂饲料(SPF级):胆固醇1%,蔗糖10%,蛋黄粉10%,豆油3%,基础饲料66%,购自黑龙江中医药大学安全评价动物中心。
1.1.4 主要仪器 7150型全自动生化分析仪(日本日立公司),罗氏血糖仪(德国罗氏诊断有限公司),可见分光光度计(THERMO,US),离心机(THERMO,US),Milli-Q超纯水仪(美国Millipore公司)。
1.2 实验方法
1.2.1 实验用刺五加叶纯化物的制备 取刺五加叶2.0 kg粉碎,加10倍重量的70%乙醇回流提取2次,每次提取2 h,将滤液浓缩至密度为1.18 g/mL后加入浓度为水至乙醇终浓度为40%,静置12 h,离心,得上清液。上清液减压回收乙醇后加入一定量水分散至8 L后上DM-301型大孔吸附树脂柱,大孔吸附树脂用量为4 kg,收集水洗脱液重量为10 kg,用浓度为90%的乙醇8 kg进行洗脱,减压回收90%乙醇洗脱液,得刺五加叶治疗2型糖尿病提取物136 g。
1.2.2 2型糖尿病模型的建立 实验用SD大鼠于黑龙江中医药大学标准条件下适应1周,期间自由进食、自由饮水。正常对照组给予基础饲料喂养。其余大鼠给予高脂高糖饲料喂养8周后,禁食不禁水12 h,按30 mg/kg剂量一次性腹腔注射2%STZ工作液(4 ℃预冷的0.1 mM杆檬酸缓冲液新鲜配制,避光,pH4.5)。正常对照组则注射相应剂量的柠檬酸缓冲液。注射3 d后,禁食12 h尾静脉取血测空腹血糖,以FBG7.8 mmol/L为成功建立2型糖尿病模型的标准。
1.2.3 分组与给药 正常对照组SD大鼠(雄性,180~220g)10只,按标准随机选取,给予标准饲料;将造模成功的2型糖尿病大鼠随机分为6个组:模型对照组,阳性药物组(参芪降糖胶囊),刺五加叶乙醇提取物组,刺五加叶纯化物高剂量组(800 mg/kg),刺五加叶纯化物中剂量组(400 mg/kg),刺五加叶纯化物低剂量组(200 mg/kg),每组10只。正常对照组和模型对照组给予等量蒸馏水,其余各
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