第二章 基因工程工具酶-课件.pptVIP

λ-DNA作为载体的优点 λ-DNA可在体外包装成噬菌体颗粒，能高效转染大肠杆菌； λ-DNA载体的装载能力为25 kb，远远大于质粒的装载量； 重组λ-DNA分子的筛选较为方便； 重组λ-DNA分子的提取较为简便； λ-DNA载体适合克隆和扩增外源DNA片段，但不适合表达外源基因。 考斯质粒 考斯质粒（cosmid） 考斯质粒载体的构建： 考斯质粒是一类人工构建的含有 1978年Collins和Hohn发明构建 pHC79 6400 bp Tcr l fragment cos ori Apr PstI BamHI SalI l-DNA cos序列和质粒复制子的 特殊类型的载体。 cos site - carrying plasmid 1.8 kb的l-DNA片段 + pBR322片段 装载范围为31 - 45 kb 考斯质粒（cosmid） 考斯质粒载体的特点： 能像l-DNA那样进行体外包装，并高效转染受体细胞 装载量大（45 kb） 能像质粒那样在受体细胞中自主复制 重组操作简便，筛选容易 不能体内包装，不裂解受体细胞 人工染色体载体 人类、动物、植物的全基因组序列分析往往需要克隆数百 甚至上千 kb 的DNA片段， 此时考斯质粒和噬菌粒载体的装载 量也远远不能满足需要。 人工染色体载体是染色体片段组成的载体，当大片段的外 源DNA克隆