论文-桃果实中番茄红素的测定详解.docVIP

课外学术科技作品竞赛 论 文 作品名称： 桃中番茄红素的测定 桃中番茄红素的测定 摘要：通过实地调查和各方面资料的查阅，考虑到资金和时间等多方面的实际情况，本项目通过选取水蜜桃以研究对象，测定其果实中番茄红素的含量，为进一步研究桃果实中番茄红素发育机制奠定基础，为高番茄红素含量桃新品种的选育、选购提供依据。本文试图用紫外分光光度法测定番茄红素，但由于用纯番茄红素作标准液时，标准液不稳定，并且难以保存，且番茄红素一般不易得到，因而本文用苏丹Ⅲ代替番茄红素作为标准进行番茄红素的测定，从而得到水蜜桃中番茄红素含量的相关测定数据，为人们的选购、选育提供依据。 关键词 ： 番茄红素 苏丹Ⅲ 紫外分光光度法 测定 目 录 中文摘要………………………………………………………………2 目录……………………………………………………………………3 1 材料与方法………………………………………………………4 1.1 仪器和药品………………………………………………………4 1.2 原理与方法………………………………………………………4 1.3 苏丹三在不同溶剂中的紫外图谱………………………………5 2 苏丹三的标准曲线的绘制………………………………………8 3 测定方法的检验 …………………………………………………9 4 样品中存在干扰成分时的测定…………………………………11 4.1 番茄红素提取液的制备…………………………………………11 4.2 存在干扰的情况下地测定………………………………………11 4.3 新标准曲线的绘制………………………………………………11 5 结果及讨论 ………………………………………………………13 5.1 测定结果…………………………………………………………13 5.2 分析讨论…………………………………………………………13 参考文献 ………………………………………………………………15 番茄红素是一种天然的类胡萝卜素，属多烯烃化合物，番茄红素有预防前列腺癌、乳腺癌及消化道癌等的作用，并且在预防心血管疾病方面有积极作用。因此，近年来，对番茄红素的研究受到越来越多人的关注。该实验以苏丹Ⅲ为标准样品采用紫外分光光度法测定桃中番茄红素的含量。 1、 材料与方法 1. 1仪器和药品 UV2102PCS型紫外可见分光光度计；氯仿，丙酮，石油醚，无水乙醇，甲醇，水蜜桃。 1. 2原理和方法 桃果实及其制品中的番茄红素较为稳定，而分离提纯后的番茄红素却极易被氧化或异构化，即使是番茄红素的溶液其吸光度亦随放置 时间的延长而衰减。故标准溶液不易保存，给番茄红素的定量带来困难，因此将苏丹Ⅲ作为标准溶液用于番茄红素的定量分析。 图1为番茄红素和苏丹Ⅲ的光谱图，由图表明在440nm～600nm之间，番茄红素和苏丹Ⅲ具有相似的光谱性质，并且两者在490nm附近有较大的吸收值，在600nm处吸收值几乎为零。因此，我们认为用苏丹Ⅲ替代番茄红素作为标准样品是可行的。根据李增光的番茄酱中番茄红素的测定的实验数据可得到番茄红素和苏丹Ⅲ的色谱分离数据。 图1. 苏丹Ⅲ（……）和番茄红素（——） 的吸收光谱图（纵坐标为吸收值） 根据图1数据显示，本实验将采用500nm处的吸收峰为最佳波长。 1.3 苏丹Ⅲ在不同溶剂中的紫外图谱（如图2.） 丙酮（1） 氯仿（2） 乙醇（3） 石油醚（4） 石油醚+2%氯仿（5） 图2（实线表示β-胡萝卜素，虚线表示苏丹Ⅲ） 由上述图可看出，苏丹Ⅲ在几种不同溶剂中均有类似的吸收峰。但是峰的位置稍有变化。无论在何种溶剂中，均以中间的峰为最强。从对比图图（1）～图（5）可以看出苏丹Ⅲ在丙酮、乙醇、氯仿、石油醚和石油醚+2%氯仿中吸收光谱特征明显，而且这几种溶剂本身又没有紫外吸收，因而适宜作为测定的溶剂。考虑到苏丹Ⅲ在丙酮、乙醇溶解能力较差，实际操作过程中极易造成苏丹Ⅲ的过饱和，使测定结果低于实际值，而氯仿和石油醚溶解苏丹Ⅲ的能力更强，同时参照前人的数据，石油醚+2%氯仿的溶解效果更好，故采用石油醚+2%氯仿作为溶剂来测定，提高方法的准确度。 2、苏丹Ⅲ的标准曲线的绘制 准确称取干燥的苏丹Ⅲ4.0mg，在100mL容量瓶中用2.0mL氯仿溶解后，以石油醚定容。待苏丹Ⅲ完全溶解后，迅速将上述苏丹Ⅲ标准溶液稀释成不同的浓度，如表1，分别在500nm处测定其吸光度值如表2，并以吸光度值对苏丹Ⅲ浓度作图，得出苏丹Ⅲ标准吸收曲线如图3所示。 表1. 苏丹Ⅲ溶液/mL 稀释液体积 （石油醚定容）/mL 浓度ug/mL 0.5 1.0 2.0 4.0 8.0 100 100 100 100 100 0.02 0.04 0.08 0.16 0.32