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第二章 核酸化学 核酸化学 第一节 核酸通论 第一节 核酸通论 核酸的种类和分布 5′-磷酸核苷酸的基本结构 稀有核苷 常见（脱氧）核苷酸的结构和命名 2 细胞内游离核苷酸及其衍生物 腺苷酸及其多磷酸化合物 cAMP(cGMP)的结构 第三节 DNA的结构 DNA、RNA的一级结构 （一）DNA 的一级结构 DNA一级结构的表示法 （二）DNA的二级结构 2、 DNA的双螺旋结构（1）DNA的双螺旋结构的形成 （2）DNA的双螺旋模型特点 （2）DNA的双螺旋模型特点 3 DNA的双螺旋结构稳定因素 4 DNA的双螺旋结构的意义 三种DNA双螺旋构象比较 （三）DNA的三级结构 螺旋和超螺旋电话线 DNA超螺旋结构的形成 动物病毒切面模式图 组蛋白与DNA的结合 核小体盘绕及染色质示意图 真核生物染色体DNA组装不同层次的结构 DNA超螺旋结构形成的意义 第四节 RNA的结构 （三）rRNA的结构 （四）mRNA的分子结构 原核细胞mRNA的结构特点 真核细胞mRNA的结构特点 第五节 核酸的性质 分子杂交的原理示意图 Southern印迹法 1、热变性的DNA分子在适当条件下可以复性，条件之一是（ ）A、骤然冷却???? B、缓慢冷却???? C、浓缩???? D、加入浓的无机盐2、tRNA的分子结构特征是( ) A、有反密码环和 3’—端有—CCA序列????B、有密码环??? C、有反密码环和5’—端有—CCA序列???D、5’—端有—CCA序列3、下列关于DNA分子中碱基组成的定量关系哪个是不正确的？（ ）A、C+A=G+T???? B、C=G???? C、A=T???? D、C+G=A+T （一）一般理化性质 性状：DNA为白色纤维状固体，而RNA为白色粉末。 溶解度：DNA和RNA均不溶于一般的有机溶剂，微溶于水， 但它们的钠盐在水中溶解度较大。 DNA溶液的黏度比RNA溶液大的多。 （二）核酸的水解 1 酸水解 核酸分子内糖苷键和磷酸二酯键对酸的敏感程度不同。 2 碱水解 DNA和RNA对碱的耐受程度有很大差别。 例如，在0.1 mol/L NaOH溶液中，RNA几乎可以完全水解，生成2′或3′核苷酸；DNA在同样条件下则不受影响。这种水解性能上的差别，与RNA核糖上2′-OH的邻基参与作用有很大的关系。在RNA水解时，2′-OH首先进攻磷酸基，在断开磷酯键的同时形成环状磷酸二酯，再在碱的作用形成水解产物。 DNA一般对碱稳定，RNA对碱不稳定。 3 酶水解 按作用的底物分为核糖核酸酶(RNAase)和脱氧核糖核酸酶 (DNAase) 根据作用方式又分为两类：核酸外切酶和核酸内切酶。 核酸外切酶的作用方式是从核苷酸链的一端（3′端或5′端）开始，逐个水解切除核苷酸；核酸内切酶的作用方式刚好和外切酶相反，它从核酸链的内部开始，在某个位点切断磷酸二酯键。 在分子生物学研究中最有应用价值的是限制性核酸内切酶。这种酶可以特异性的水解核酸中某些特定碱基顺序部位。 按核酸水解的键不同，可分为核酸酶和N糖苷酶。 （三）核酸的酸碱性质 两性解离的性质 等电点偏酸性 （四）核酸的紫外吸收 在核酸分子中，由于嘌呤碱和嘧啶碱具有共轭双键体系，因而具有独特的紫外线吸收光谱，最大吸收峰波长（λmax）在260nm处，可以作为核酸及其组份定性和定量测定的依据。 1 天然DNA 2 变性DNA 3 核苷酸总吸收值 220 240 260 280 0.1 0.2 0.3 0.4 波长（nm） 光吸收 1 2 3 （四）核酸的紫外吸收 首先根据A260/A280的比值判断核酸样品的纯度 纯DNA：A260/A280=1.8 纯RNA：A260/A280=2.0 （若样品中含有杂蛋白或苯酚，则A260/A280比值明显降低） 纯的核酸样品可根据260nm的光吸收值算出其含量 若260nm光吸收值为1相当于50μg/ml双螺旋DNA 或相当于40μg/ml单链DNA或RNA 或相当于20μg/ml寡核苷酸 增色效应：核酸发生变性时，摩尔磷消光系数增加的现象。 减色效应：复性后，摩尔磷消光系数又降低的效应。 磷摩尔消光系数 （五）DNA的变性、复性与杂交 1 DNA的变性 在物理、化学因素影响下， DNA碱基堆积力和碱基对之间的氢键受到破坏，双螺旋解开，从而引起理化性质及生物学功能的改变，这种现象称为核酸的变性。 变性核酸将失去其部分或全部的生物