核酸降解与核苷酸代谢分析.ppt

第33章 核酸降解与核苷酸代谢 一、概述 二、核酸与核苷酸的分解代谢 三、核苷酸的生物合成 四、辅酶核苷酸的生物合成 作为核酸合成的原料: ----最主要的功能 体内能量的利用形式 ATP----主要形式；GTP----蛋白质合成 UTP----糖原合成；CTP----磷脂合成 参与代谢和生理调节----cAMP, cGMP 组成辅酶----NAD,FAD, CoA 活化中间代谢物---UDPG, CDP-DG 2.1 核酸的解聚作用 Nuclease: 作用于核酸的?二酯键的酶。(即?二酯酶) 专一性：(底物) RNase ：ribonuclease DNase ：deoxyribonuclease 作用方式： 内切酶：作用点在核酸内部，产物是寡核苷酸链。 外切酶：作用于核酸两端，产物是单核苷酸。 1. 核酸外切酶 非特异性的?二酯酶，从核酸的一端逐个水解掉核苷酸。 如： 蛇毒?二酯酶—— 作用于DNA 或 RNA 的 3’-OH，?5’- 核苷酸 牛脾?二酯酶—— 作用于DNA 或 RNA 的 5’-OH，?3’- 核苷酸。 2. 核酸内切酶 特异地水解核酸内部的?二酯酶。 如：RNase I (牛胰核糖核酸酶)—— 作用于RNA 的嘧啶碱基?末端为3’- ?嘧啶的核苷酸 RNase II——作用于嘌呤碱基 DNase I (牛胰脱氧核糖核酸酶)：对碱基无选择性 作用点：5’-末端 产物：四寡核苷酸 DNase II (牛脾脱氧核糖核酸酶)： 作用点：3’-末端 产物：六寡核苷酸 3. 限制性(核酸)内切酶——工具酶 专一性很强，与甲基化酶识别同一位点。 作用点：核酸的回文序列。 产物：形成粘性末端(cohesive end)或平齐末端 (blunt end) 粘性末端：双链DNA经限制性内切酶作用后，每条单链的一端都带有识别序列中的几个互补碱基。 命名： 以EcoR I为例：E—细菌属名、co—细菌种名 R—菌株、 I—同类酶的(罗马字母)编号 产物：不同生物的酶系不同，嘌呤的分解产物也就不同。 ?尿酸——人类、灵长类、鸟类、爬行类、大多数昆虫 ?尿囊素——其它动物 ?氨、CO2和有机酸(如乙醛酸)—— 微生物和植物的衰老叶片、胚乳 二、嘧啶核苷酸的分解代谢 两个阶段 第一阶段：次黄嘌呤核苷酸(IMP)的合成 第二阶段：腺嘌呤核苷酸(AMP)与鸟嘌呤 核苷酸(GMP)的生成 （ 2 ）AMP和GMP的生成 4. 嘌呤核苷酸从头合成特点 ? 嘌呤核苷酸是在磷酸核糖分子上逐步合成的。 ? IMP的合成需5个ATP，6个高能磷酸键。 AMP或GMP的合成又需1个ATP。 （二）嘌呤核糖核苷酸的补救合成途径 4.补救合成的生理意义 补救合成节省从头合成时的能量和一些氨基酸的消耗。 体内某些组织器官，如脑、骨髓等只能进行补救合成。 嘧啶核苷酸的结构 （一）嘧啶核糖核苷酸的从头合成 （二） 嘧啶核苷酸的补救合成 一些嘌呤、氨基酸或叶酸等的类似物，以竞争性抑制或“以假乱真”等方式干扰或阻断嘌呤核苷酸的合成代谢，从而进一步阻止核酸以及蛋白质的生物合成。具有抗肿瘤作用 氨基酸类似物：氮杂丝氨酸、6-重氮-5-氧正亮氨酸等，结构与谷氨酰胺相似，可干扰谷氨酰胺在嘌呤核苷酸合成中的作用 叶酸类似物：氨蝶呤及甲氨蝶呤，竞争性抑制二氢叶酸还原酶，抑制了四氢叶酸的生成，干扰了一碳单位代谢，从而抑制了嘌呤核苷酸的合成。 2.嘧啶核苷酸的抗代谢物 常见抗代谢药 甲氨喋呤(MTX)、氟尿嘧啶(5-FU)。其衍生物很多，包括喃氟啶(FT207)、优福啶(UFT)、卡莫氟(嘧福禄HCFU)、脱氧氟尿苷(氟铁龙5-DFUR)、氟尿脱氧核苷(FUDR)，临床上可根据病种，肝功能状态等合理选用。 环胞苷(CC)、阿糖胞苷(Ara-c)、双氟胞苷(健择Gemcitabine)为新的嘧啶类似物。其化学结构与Ara-c相似，为核糖核苷还原酶抑制剂。其抗瘤谱较Ara-c广，对非小细胞肺癌有效，对胰腺癌、乳腺癌、卵巢癌、头颈部癌也可能有效。六甲嘧胺(克瘤灵HMM)对肺癌特别是小细胞肺癌、霍奇金病、卵巢癌、乳腺癌及消化道癌有一定疗效。 双氟胞苷(Gemcitabine)，一种新的嘧啶类似物，其结构与抗代谢药阿糖胞苷相似. 研究表明，双氟胞苷能延长无法切除的胰腺癌患者的生存期，中位生存期5.65mo，较5-FU(4.４1mo)有提高，统计分析有意义. 一年生存率18%，亦较5-FU(2%)提高. 双氟胞苷在缓解癌症相关的疼痛、体质量方面较5-FU更