基因工程-分析.ppt

重组 DNA 技术 方法 酶切筛选 （四）组织特异性表达载体使外源基因在特定组织表达 把某种组织特异性的调控序列（如启动子）构建于表达载体，使外源基因的表达严格受控于该调控序列，就形成了组织特异性表达载体 该类载体为研究特定组织的发育和针对特定组织或器官的基因治疗提供了有效手段 目前研究较多的有乳腺组织特异性表达载体，它是基因工程药物的生物反应器；肿瘤细胞特异性表达载体能在肿瘤细胞内有效表达毒性蛋白，从而特异性杀伤肿瘤细胞；神经组织特异性表达载体，对治疗早老性痴呆具有积极作用 （五）双启动子和串联启动子表达载体各有特殊用途 一般的表达载体只有一个启动子，为了特殊需要，可给表达载体组装两个启动子，构成双启动子表达载体，旨在方便地研究不同条件下的基因表达情况或分别启动不同基因的表达。 有时为了提高目的基因的表达水平，可将两个或两个以上的相同启动子串联在一起，构成串联启动子表达载体。 （六）某些表达载体用于表达非蛋白分子 有些表达载体不用于表达蛋白质，而是用于表达小分子干扰RNA（small interfering RNA，siRNA）或微小RNA（micro RNA，miRNA）等。 例如，目前，用于表达siRNA的载体已有多种（如pSilencer2.1-U6 neo，mU6pro等）。 四、载体上的常用标志或标签 载体上的标志（marker）：通常用于重组子或阳性克隆的筛选