丝状真菌的遗传.分析报告.pptVIP

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在准性生殖过程中异核体产生二倍体的概率是 10-6,二倍体产生单倍体的概率是10-3,二倍体核中发生体细胞交换的概率是10-2。 体细胞交换和单元化是两个独立发生的事件,二者发生在同一细胞中的概率很小,同一染色体上发生两次交换的概率同样很小。 第四节 丝状真菌的遗传物质 真菌的遗传物质包括5种成分: 染色体基因 线粒体基因 质粒 转座因子 病毒基因 除丝状真菌基因组含有较少的(约为2%~5%)重复DNA序列外,丝状真菌的核基因组和线粒体基因组及其结构功能与高等真核生物类似。丝状真菌单倍体通常含有6~8个线状染色体,基因组大小平均为2×107~4×107bp。 真菌的基因也有内含子,但一般较短,大约50~200bp。如粗糙脉孢菌单倍体基因组为4.3×107bp,G+C含量为54%,每条染色体的大小为4~10.3Mb。已经对粗糙脉孢菌中的2000多个不同的基因进行了鉴定。 一、核基因组结构 丝状真菌线粒体DNA是大小为几十kb的环状结构,它含16S和23S rRNA基因和20多个tRNA基因,还有几个与电子传递链有关的结构基因。 线粒体基因组在正常复制过程中经常发生分子内重组,造成基因组大小的多变。重组的内容和方式有多种,如线粒体DNA重排、DNA片段的插入或缺失,还有因内含子剪接不同造成基因内所含内含子数目不等等。 二、线粒体基因组 自从1989年从自然界分离的粗糙脉孢菌中发现了丝状真菌的第一个转座子Tad以来,从许多其他丝状真菌中也发现了转座因子,而且转座因子与植物病原菌的致病和培养性状的高度变异有关。很多真菌细胞内带有质粒,有些真菌细胞内含有病毒。 三、质粒、转座因子及病毒 大多数丝状真菌中的质粒位于线粒体内,目前还没有发现质粒对寄主真菌的生长有明显的影响。也许质粒能够赋予寄主选择优势,如在线粒体代谢或分裂的某些方面。另外,有些质粒与宿主真菌的老化有关。 第五节 丝状真菌中的质粒 真菌细胞中的质粒一般是环状或线性的双链DNA分子,而且大多是不编码任何表型性状的隐蔽质粒,位于细胞核或线粒体内。 1. 线性质粒 ①有末端反向重复序列(TIR),其长度因质粒种类而异 ②质粒的两个5′末端各有一个结合蛋白,保护质粒不受核酸外切酶的破坏 ③有两个非重叠的ORF,每个 ORF都起始于末端反向重复序列内,但转录方向相反,即转录方向都是从末端指向中央。其中一个ORF编码DNA聚合酶,另一个编码RNA聚合酶,它们与噬菌体和酵母线粒体中的聚合酶具有相似性。在两个ORF之间有基因间隔区,虽然含有转录信号,但尚未发现有什么功能。 一、质粒的类型 2. 环状质粒 Fiji和LaBelle这两种环状质粒编码DNA聚合酶;Mauriceville和 Varkud这两种质粒编码反转录酶。 脉孢菌属中的环状质粒都产生全长的RNA转录物,特别是Mauriceville和Varkud质粒。 大多数真菌的线性质粒也具有末端重复序列(TIR)和共价结合蛋白(TP) 。有些质粒具有像脉孢菌那样的两个ORF,但有些只有一个ORF。 不同的质粒,其ORF的排列可能也不同。有些质粒如尖孢镰刀菌中的质粒:pFOXC1、pFOXC2、pFOXC3则编码反转录酶。 立枯丝核菌中的3个线性质粒在几方面表现出非典型性,它们的末端似乎是闭合的发夹结构,其ORF都不大于91个氨基酸。 3. 其他丝状真菌中的质粒 一般线粒体质粒的遗传与线粒体和线粒体DNA(mtDNA)有相同的遗传方式。在有性杂交中,母本的质粒绝大多数或全部地传递给子代,一个例外是四孢壳孢菌AL2菌株中的 pAL2-l质粒,当AL2在杂交中作为母本时,有些后代不含质粒。 实验室内的研究表明,在种内和种间存在着质粒水平转移。 二、质粒的遗传 中脉孢菌的Kalilo质粒和粗糙脉孢菌中的Mauriceville质粒能整合到线粒体DNA上,引起寄主菌株的衰老和死亡。 质粒的存在与菌株的衰老呈正相关,质粒的转移也引起衰老表型在菌株间的转移,最终在寄主死亡之前或死亡之时,几乎所有衰老菌株的mtDNA分子都是整合型,但游离的质粒也存在于培养物中。 三、质粒的整合 导入外缘DNA的方法 CaCl2/PEG介导的原生质体转化 醋酸锂介导的转化 电转化 基因枪 载体 整合型转化(转化DNA的整合不需要广泛的序列同源性) 复制型转化(ARS) 3. 选择性标记 营养互补标记 显性标记 第六节 丝状真菌的转化 试述高等动植物、细菌和不完全菌三类生物的生活史特点? 粗糙脉孢菌的子囊孢子为什么有6种排列方式?它们是如何产生的?

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