2015-2016学年高二人教版生物选修三配套课件：1.2 基因工程的基本操作程序 .pptVIP

四、目的基因的检测与鉴定 1、分子水平的检测 2.个体生物学水平的鉴定 ③检测目的基因是否翻译成蛋白质 方法是： 抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等 ——检查目的基因是否成功表达 ②检测目的基因是否转录出了mRNA 方法是： ①检测转基因生物的DNA 上是否插入了目的基因 方法是： DNA分子杂交 （DNA——RNA）分子杂交 抗原——抗体分子杂交 DNA分子杂交示意图 　　采用一定的技术手段，将两种生物的DNA分子的单链放在一起，如果这两个单链具有互补的碱基序列，那么，互补的碱基序列就会结合在一起，形成杂合双链区；在没有互补碱基序列的部位，仍然是两条游离的单链。 过程: A．首先提取出转基因生物的DNA。 B．对含目的基因的DNA片段作放射性同位素标记，以此做基因探针。 C．用基因探针和提取的转基因生物的DNA杂交。若显示出杂交带，表明转基因生物的DNA中已插入目的基因；反之，则没有插入。 DNA分子杂交 鉴定—— 抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等 　　例：用棉铃饲喂棉铃虫，如虫吃后不出现中毒症状，说明未摄入目的基因或摄入目的基因未表达。如虫吃后中毒死亡，则说明摄入了抗虫基因并得到表达。 思考：若培育耐盐碱的水稻，如何鉴定？ 归纳： 基因工程的基本操作程序 获取目的基因 从基因文库 利用PCR 化学方法人工合成 构建基因表达载体 目的基因、启动子、终止子、标记基因 将目的基因导入受体细胞 农杆菌转化法、显微注射法 目的基因的检测与鉴定 检测：是否插入、转录、翻译 鉴定： 学以致用 　　　若用Bt毒蛋白基因作为目的基因培育转基因抗虫棉，可用什么方法？叙述培育过程！ 练习１：(2008理综山东卷)为扩大可耕地面积，增加粮食产量，黄河三角洲等盐碱地的开发利用备受关注。我国科学家应用耐盐基因培育出了耐盐水稻新品系。 （１）获得耐盐基因后，构建重组DNA分子所用的限制性内切酶作用于图中的 处，DNA连接酶作用于 处。（填“a”或“b”） a a （２）将重组DNA分子导入水稻受体细胞的常用方法有农杆菌转化法和 法。 （３）由导入目的基因的水稻细胞培养成植株需要利用 技术，该技术的核心是 和 。 （４）为了确定耐盐转基因水稻是否培育成功，既要用放射性同位素标记的 作探针进行分子杂交检测，又要用　　　　　　　　方法从个体水平鉴定水稻植株的耐盐性。 基因枪法（花粉管通道法） 植物组织培养 脱分化和再分化 耐盐基因 一定浓度盐水浇灌 练习２：继哺乳动物乳腺生物反应器研发成功后，膀胱生物反应器的研究也取得了一定进展。最近，科学家培育出一种转基因小鼠，其膀胱上皮细胞可以合成人的生长激素并分泌到尿液中。请回答： （1）将人的生长激素基因导入小鼠受体细胞，常用方法是____________________。 （2）进行基因转移时，通常要将外源基因转入 中，原因 （3）通常采用____________________技术检测外源基因是否插入了小鼠的基因组。 （4）在研制膀胱生物反应器时，应使外源基因在小鼠的__________细胞中特异表达。 显微注射 受精卵 受精卵（或早期胚胎细胞）具有全能性，可使外源基因 DNA分子杂交 膀胱上皮 （或早期胚胎） 在相应的组织细胞中表达。 * 1.2 基因工程的基本操作程序 1．目的基因的获取 2．基因表达载体的构建 3．将目的基因导入受体细胞 4．目的基因的检测与鉴定 基因工程基本操作的四个步骤 目的基因的获取 阅读课本第一自然段，回答以下问题： 2．获取目的基因的常用方法有哪些？ （1）从基因文库中获取 （2）利用PCR技术扩增 （3）人工合成 1．什么叫目的基因？并举例说明。 　　主要是编码蛋白质的基因，也可以是一些 具有调控作用的因子 1．原核细胞的基因结构 非编码区 非编码区 编码区 与RNA聚合酶结合位点 启动子 终止子 启动子：是一段有特殊结构的DNA片段，位于基因首端是RNA聚合酶识别和结合的部位并能驱动基因转录出mRNA。没有启动子，基因就不能转录。 终止子：位于基因的尾端的一段特殊的DNA片断，它能阻碍RNA聚合酶的移动，并使其从DNA模板链上脱离下来，使转录终止。 编码区 非编码区 非编码区 内含子 外显子 启动子 终止子 2．真核细胞的基因结构 注意： 原核基因转录出的mRNA只能与编码区的 链配对， 与编码区中互补链呢？ 真核基因转录出