【创新大课堂】2016届高三生物一轮复习人教版课件 选修1 第2讲 微生物的培养与应用 .pptVIP

考点·全线突破 考点一　微生物的实验室培养 [关键点击] 1．培养基的种类 (1)按物理状态分类 (2)按功能分类 2.消毒和灭菌的比较 3.微生物的纯化培养－平板划线法与稀释涂布平板法 考点二　分解尿素细菌的分离和计数 [关键点击] 1．筛选菌株的原理 在选择培养基的配方中，把尿素作为培养基中的唯一氮源，原则上只有能够利用尿素的微生物才能够生长。 2．统计菌落数目的方法 (1)显微镜直接计数法 ①原理：利用特定细菌计数板或血细胞计数板，在显微镜下计算一定容积的样品中微生物数量。计数板是一块特制的载玻片，上面有一个特定的面积为1 mm2和高为0.1 mm的计数室，在1 mm2的面积里又被划分成25个(或16个)中格，每个中格进一步划分为16个(或25个)小格，但计数室都由400个小格组成。 ②操作：将清洁干燥的血细胞计数板盖上盖玻片，再将稀释的样品滴在盖玻片边缘，稍等片刻，待细菌全部沉降到计数室底部再在显微镜下统计4～5个中格中的细菌数，并求出每个小格所含细菌的平均数，再按公式求出每毫升样品中所含的细菌数。 ③计算公式：每毫升原液所含细菌数＝每小格平均细菌数×400×10 000×稀释倍数。 ④缺点：不能区分死菌与活菌。 (2)间接计数法(活菌计数法) ①原理：当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个菌落，来源于样品稀释液中的一个活菌。通过统计平板上的菌落数，就能推测出样品中大约含有多少活菌。 ②操作 a．设置重复组，增强实验的说服力与准确性。将待测样品经一系列10倍稀释，选择三个稀释度的菌液，分别取0.1 mL接种到已制备好的平板上，用无菌涂布器将菌液涂布于整个平板表面，放在适宜的温度下培养，计算菌落数。 b．为了保证结果准确，可将同一稀释度的菌液加到3个或3个以上的平板上，进行涂布、培养，一般选择菌落数在30～300的平板进行计数。 c．实验误差：利用稀释涂布平板法统计的菌落数往往比活菌的实际数目低。这是因为当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落。 ③计算公式：每克样品中的菌株数＝(C÷V)×M C代表某一稀释度下平板上生长的平均菌落数， V代表涂布平板时所用的稀释液的体积(mL)， M代表稀释倍数。 考点三　分解纤维素的微生物的分离 [关键点击] 1．两种刚果红染色法的比较 2.分离纤维素分解菌 (1)分离纤维素分解菌的实验中先用选择培养基，再用鉴别培养基。选择培养基为液体培养基，以纤维素作为碳源和能源的微生物可以正常生长，而其他绝大多数微生物不能正常生长；因培养基中无凝固剂，为液体培养基，利用液体培养基能使营养成分充分消耗，以增加纤维素分解菌的浓度。 (2)鉴别培养基含琼脂，为固体培养基，因为要在培养基上形成我们肉眼可见的菌落。刚果红染色法应用的就是此培养基。 3．微生物的鉴别 (1)外观特征鉴别：根据微生物在固体平板培养基表面形成的菌落的形状、大小、隆起程度和颜色等特征进行鉴别。 (2)指示剂鉴别：如分解尿素的细菌的鉴别，培养基中加入酚红指示剂，培养某种微生物后，培养基变红说明该种微生物能够分解尿素。 (3)染色法鉴别：如分解纤维素的微生物的鉴别，利用刚果红染色法，根据具有不变红的透明圈的菌落鉴别能分解纤维素的微生物。 (4)根据培养基筛选微生物 ①营养缺陷型选择培养基：通过控制培养基的营养成分，使营养缺陷型微生物不能正常生长。例如，无氮培养基可以分离自生固氮微生物；石油作为唯一碳源时，可以分离出能消除石油污染的微生物；以尿素为唯一氮源的培养基可以分离尿素分解菌等。 ②在培养基中加入某种化学物质的选择培养基：在完全培养基中加入某些化学物质，利用加入的化学物质对微生物产生的影响，抑制某些微生物，同时选择所需的微生物。例如，加入青霉素可以分离出酵母菌和霉菌等真菌，同时抑制细菌的生长；加入高浓度的食盐可以选择培养金黄色葡萄球菌。 4．微生物纯化的三种途径 (1)单菌落挑取法：利用平板划线法或稀释涂布平板法接种到固体平板培养基表面，直接根据微生物菌落的特征利用单菌落挑取的方法获得目的微生物。 (2)选择培养法：利用选择培养基对微生物进行选择培养，直接获得目的微生物。 (3)鉴定培养法：利用鉴别培养基使目的微生物菌落呈现特有的特征，然后筛选目的微生物。 考情·随堂体验 考情一　微生物的实验室培养 1．高中生物学实验中，在接种时不进行严格无菌操作对实验结果影响最大的一项是 (　　) A．将少许干酵母加入到新鲜的葡萄汁中 B．将毛霉菌液接种在切成小块的鲜豆腐上 C．将转基因植物叶片接种到无菌培养基上 D．将土壤浸出液涂布在无菌的选择培养基上 解析　在酿制葡萄酒的过程中，如果灭菌不彻底会影响葡萄酒的品质，但影响不大；在制作腐乳的过程中，发酵过程有多种微生物的参与，所以该过程不进行严格的无菌操作对结果影响不大