第八讲：细菌的耐药性【硕士研究生】剖析.ppt

（1）钝化酶的产生 钝化酶(modified enzyme)指一类由耐药菌株产生、具有破坏或灭活抗菌药物活性的某种酶，它通过水解或修饰作用破坏抗生素的结构使其失去活性,如分解青霉素的酶或改变氨基糖苷类抗生素结构的酶。 重要的钝化酶有以下几种： β内酰胺酶 氨基糖苷类钝化酶 氯霉素乙酰基转移酶 红霉素酯化酶 甲基化酶 1）β内酰胺酶 ( lactamase) 对青霉素类和头孢菌素类耐药的菌株可产生β-内酰胺酶,该酶能特异性的使酰胺键断裂，打开药物分子结构中的β-内酰胺环，使其完全失去抗菌活性，故称灭活酶 (inactivated enzyme)。β-内酰胺酶可由细菌染色体、质粒或转座子编码，分布广泛。 在革兰阴性杆菌中，对β-内酰胺抗生素的耐药性主要由两种β-内酰胺酶介导： 超广谱β-内酰胺酶 (extended spectrum β-1actamases，ESBLs) AmpC β-内酰胺酶 2）氨基糖苷类钝化酶 (aminoglycoside-modified enzymes) 细菌能产生30多种氨基糖苷类钝化酶，并均由质粒介导。 这些酶类分别通过羟基磷酸化、氨基乙酰化或羧基腺苷酰化作用，使药物的分子结构发生改变，不易与细菌核糖体30S亚基结合，失去抗菌作用。 由于氨基糖苷类抗生素结构相似，故常出现明显的交叉耐药现象。 3）氯霉素乙酰转移酶 (chloramphenicol acetyl transferase，CAT) 由细菌质粒或染色体基因编码，能在大肠杆菌中稳定表达 作用机制：将氯霉素乙酰化，使其不能与细菌 50S核糖体亚基结合而失去抗菌活性。 4）红霉素酯化酶 由质粒介导，作用机制是水解红霉素及大环内酯类抗生素结构中的内酯而使之失去抗菌活性。 5）甲基化酶 50S亚基嘌呤甲基化耐红霉素 （2）药物作用靶位的改变 细菌能改变抗生素作用靶位的蛋白结构和数量，导致其与抗生素结合的有效部位发生修饰或改变，影响药物的结合，使细菌对抗生素不再敏感。 作用靶位发生改变使抗生素失去作用靶点和（或）亲和力降低无法结合，但细菌的生理功能正常。 如青霉素结合蛋白的改变导致对β-内酰胺类抗生素耐药。 这些作用靶位结构和功能变化都有可能产生 很高的耐药性。 常用抗生素的作用靶位 抗生素 靶位 青霉素 PBPs 喹诺酮类 DNA旋转酶 利福平 RNA聚合酶β亚基 大环内脂类 核糖体50S亚基 克林霉素类 核糖体50S亚基 链霉素核糖体 核糖体30S亚基S12 （3）抗菌药物的渗透障碍 抗生素必须进入细菌内部到达作用靶位后，才能发挥抗菌效能。细菌的细胞壁障碍和(或)外膜通透性的改变，将严重影响抗菌效能，耐药屏蔽是耐药的一种机制。 G-菌细胞壁的外膜上有脂多糖，孔蛋白等通透性低，是一种有效的非特异性屏障，阻止某些抗菌药的进入，使细菌不易受到机体杀菌物质的作用。 铜绿假单胞菌对抗生素的通透性要比其他革兰阴性细菌差，这是该菌对多种抗生素固有耐药的主要原因之一。 （4）主动外排机制 多种细菌的外膜上有特殊的药物主动外排系统,药物的主动外排使菌体内的药物浓度不足，难以发挥抗菌作用而导致耐药。 有两大类外排系统：特异性（单一性）外排系统和多种药物耐药性外排系统。 主动泵出活动增强和外排药物通透性下降的协同作用与细菌的多重耐药性有关。 细菌的分泌系统具有外排功能，其结构与功能的改变与细菌的耐药性相关。 （5）细菌生物被膜作用及其他 细菌生物被膜(bacterial biofilm，BF)是细菌为适应环境而形成的，可保护细菌逃逸抗菌药物的杀伤作用。细菌生物被膜形成后耐药性可增强许多倍。 耐药机制： 抗生素难以清除BF中众多微菌落膜状物； BF具有多糖分子屏障和电荷屏障，阻止或延缓药物的渗透； BF内细菌多处于低代谢水平状态，对抗菌药物前敏感； BF内部场存在一些较高浓度水解酶，使进入的抗生素失活。 （6）细菌自身代谢状态改变 细菌通过改变自身代谢状态逃避抗菌药物作用。 呈休眠状态的细菌； 营养缺陷的细菌都可出现对多种抗生素耐药； 通过增加产生代谢拮抗剂来抑制抗生素，从而获得耐药性。 如耐药金黄色葡萄球菌通过增加对氨基苯甲酸的产量，从而耐受磺胺类药物的作用。 细菌耐药性重要名词 名 词 概 念 细菌耐药性 bacterial resistance 亦称抗药性，指细菌对药物的相对抵抗性。一般当细菌从对药物敏感状态转变为不敏感状态时称其具有了耐药性。 多重耐药性 MDR multidrug resistance, 细菌同时对多种作用机制不同、结构不同的抗菌药物产生耐药性。 交叉耐药 cross resistance 细菌对某一药物产生了耐药性后，同时对另一作用机制相似的抗菌药物也产生耐药