生物化学技术实验.pptVIP

1、? 以鸡蛋清为原料经过提取、分离、纯化等手段得到一个纯度较高的胰蛋白酶的天然抑制剂鸡卵类粘蛋白（简称CHOM），以猪胰脏为原料经过提取、分离、激活等步骤得到胰蛋白酶的粗提液。并且对所得到的鸡卵类粘蛋白和猪胰蛋白酶的含量、纯度及其生物活性进行测定。2、以SEPHAROSE 4B为载体经过活化，偶联合成一个具有专一性的特殊配基--卵类粘蛋白作为亲和吸附剂。3、 用自己合成的亲和吸附剂，通过亲和层析技术得到非常纯的猪胰蛋白酶。 实验内容提要 实验流程 1. 鸡卵类粘蛋白的制备 ?鸡卵类粘蛋白粗品的制备 ?鸡卵类粘蛋白粗品的精制 2.亲和吸附剂的合成 载体的活化 ???? 配体与载体的偶联 亲和吸附剂的装柱 3. 猪胰蛋白酶粗提液的制备及酶的精制 ??猪胰蛋白酶原的提取 ?? 胰蛋白酶原的激活 上亲和层析柱纯化 三大任务 ! 做明白人，干明白事。先动脑，再动手。！实验无小事，事事不马虎。! 实验结果和数据及时保存及处理! 保持实验室整洁。。。。。 N项注意 *胰蛋白酶标准品的比活力（BAEE单位/mg蛋白） *鸡卵类粘蛋白粗品和纯品的抑制比活力（BAEE单位/mg蛋白） *胰蛋白酶粗提液及纯品的比活力（BAEE单位/mg蛋白） *.鸡卵类粘蛋白产率(mg/100ml): 100ml鸡蛋清