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课题3 制作泡菜并检测亚硝酸盐含量 授课人:庞红霞 学习目标 1.说出泡菜制作原理 2.尝试制作泡菜 3.简述比色法原理 4.尝试用比色法测定食品中亚硝酸盐含量的变化 5.讨论食品安全问题 重点:泡菜制作过程,用比色法测定食品中亚硝酸盐含量 难点:测定泡菜中亚硝酸盐含量的原理 1.制作泡菜的原理是什么? 2.制作泡菜需要哪些原料? 3.泡菜坛应具备哪些条件?如何检测泡菜坛是否合格? 4.盐水应该按什么比例配置比较恰当?为什么要将盐水煮沸后又冷却? 5.加入香辛料和盐水有什么要求?在发酵过程怎样保证无氧环境? 6.哪些因素会导致泡菜腌制过程中亚硝酸含量增加 自学2 1.为什么要测定亚硝酸盐的含量? 2.测定的原理和方法是什么? 3.用简单的流程图表示测定步骤? 4.实验步骤中用到哪些仪器和试剂?试剂的主要作用是什么? 5.实验的变量是什么,对照组如何设置? 实验设计 测定亚硝酸盐含量的原理: 在盐酸酸化条件下,亚硝酸盐与对氨基苯磺酸发生重氮化反应后,再与N-1-萘基乙二胺盐酸盐结合生成玫瑰红溶液。将经过反应显色后的待测样品与标准液比色,即可计算出样品中的亚硝酸盐含量。 (1)泡菜发酵过程中,起主要作用的微生物是 ,其中主要产物是________,还有少量的亚硝酸。对亚硝酸盐的定量测定可以用________法,因为亚硝酸盐与对氨基苯磺酸的反应产物能与N-1-萘基乙二胺盐酸盐偶联成________色化合物。测定之前先配置 ,进行样品测定时,还要取等量水进行同样的测定,目的是________。 (2)泡菜要在发酵时间达到 以后食用才比较适宜。 * * 泡菜优点 制作容易 成本低廉 营养卫生 利于贮存 风味可口 鲜嫩清脆 增进食欲 容易消化 原料加工 修整、洗涤、晾晒、切分成条状或片状 加调味料装坛 加盐 盐水冷却 泡菜盐水 发酵 成品 测亚硝酸盐含量 一、泡菜de制作 自学1: 乳酸菌 乳酸杆菌 乳酸链球菌 根据微生物的活动情况和乳酸积累量,可以将泡菜发酵过程分为三个阶段: 发酵初期:大肠杆菌和酵母菌较为活跃,乳酸菌和乳酸的量都较少,亚硝酸盐含量有所增加。 发酵中期:由于乳酸不断积累和缺氧的形成,乳酸杆菌开始活跃,亚硝酸盐含量下降,这时泡菜完全成熟,菜有酸味而清香。 发酵后期:继续进行乳酸发酵,乳酸积累达1.2%以上时,乳酸杆菌的活性受到抑制,发酵速度逐渐变缓甚至停止。 二、亚硝酸盐含量de测定 亚硝酸盐含量的测定 2、步骤 (1)配置溶液 对氨基苯磺酸溶液(4mg/mL), N-1-萘基乙二胺盐酸盐溶液(2mg/mL) ,亚硝酸钠溶液(5ug/mL) ,提取剂(氯化镉、氯化钡溶液+),氢氧化铝乳液和2.5mol/L的氢氧化钠溶液 (2) 配制标准显色液 (3) 制备泡菜样品处理液 (4)比色 (2)制备标准显色液(标样) 对氨基苯磺酸溶液 避光保存(4mg/ml) + 浓度梯度的亚硝酸钠溶液 + N-1-萘基乙二胺盐酸盐溶液 避光保存(2mg/ml) 深浅不同的玫瑰红色 随亚硝酸钠量的增加,显色反应越充分,颜色越深 (3)制备样品处理液 泡菜汁 过滤 + 提取剂(氯化镉、氯化钡 pH=1) + NaOH (中和酸) 过滤 Al(OH)3 (吸附泡菜汁液的杂质) 过滤 透明澄清的滤液 (4)、比色 透明澄清的泡菜滤液 + 对氨基苯磺酸溶液 + N-1-萘基乙二胺盐酸盐溶液 玫瑰色 与标准显色液对比,记录对应的亚硝酸钠含量 果酒 果醋 腐乳 泡菜 微生物类型 原理 反应条件 检测方法 酵母菌,真菌,兼性厌氧 醋酸菌,细菌,好氧菌 毛霉,真菌,好氧 乳酸菌,细菌,厌氧菌 酵母菌的无氧呼吸产生酒精 20℃,无氧 重铬酸钾与其反应呈灰绿色 醋酸菌的有氧呼吸产生醋酸 30~35℃,通入氧气 品尝、pH试纸检测 毛霉产生蛋白酶和脂肪酶 15~18℃接种,酒精含量控制在12%左右 乳酸菌无氧呼吸产生乳酸 常温,无氧条件 亚硝酸盐的检测方法 课堂练习 *
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