第四章从mRNA到蛋白质分析.pptVIP

生物信息的传递（下） ——从mRNA到蛋白质 翻译(translation): 即蛋白质生物合成，是将核酸中由 4 种核苷酸序列编码的遗传信息，通过遗传密码破译的方式解读为蛋白质一级结构中20种氨基酸的排列顺序 。 主要内容 第一节 蛋白质生物合成体系 第二节 蛋白质生物合成过程 第三节 蛋白质合成后加工和运转机制 1. 遗传密码——三联子 （一）定义 遗传密码表 （二）遗传密码的性质 从mRNA 5?端起始密码子AUG到3?端终止密码子之间的核苷酸序列，各个三联体密码连续排列编码一个蛋白质多肽链，称为开放阅读框架(open reading frame, ORF)。 密码子、反密码子配对的摆动现象 3. 核糖体 在单个核糖体上，可化分多个功能活性中心，在蛋白质合成过程中各有专一的识别作用和功能。 ● mRNA结合部位——小亚基 ● 结合或接受AA-tRNA部位（A位）——大亚基 ● 结合或接受肽基tRNA的部位——大亚基 ● 肽基转移部位（P位）——大亚基 ● 形成肽键的部位（转肽酶中心）——大亚基 蛋白质生物合成过程 氨基酸活化 肽链的起始、伸长、终止 新合成多肽链的折叠和加工 氨基酰-tRNA合成酶对底物氨基酸和tRNA都有高度特异性。 氨基酰-tRNA合成酶具有校正活性(proofreading activity) 。 氨基酰-tRNA的表示方法： Ser-tRNASer Met-tRNAMet tRNA与酶结合的模型 指mRNA和起始氨基酰-tRNA分别与核蛋白体结合而形成翻译起始复合物 。 （2）30S 小亚基通过SD序列与 mRNA模板相结合 真核生物翻译起始的特点 ● 核糖体较大,为80Ｓ； ● 起始因子比较多； ● mRNA 5′端具有m7Gppp帽子结构 ● Met-tRNAMet ● mRNA的5′端帽子结构和3′端polyA都参与形成翻译起始复合物； 真核生物翻译起始复合物形成 (区别原核生物) 原核生物中30S小亚基首先与mRNA模板相结合，再与fMet-tRNAfMet结合，最后与50S大亚基结合。而在真核生物中，40S小亚基首先与Met-tRNAMet相结合，再与模板mRNA结合，最后与60S大亚基结合生成80S·mRNA·Met-tRNAMet起始复合物（P124）。 肽链延伸由许多循环组成，每加一个氨基酸就是一个循环，每个循环包括：AA-tRNA与核糖体结合（进位）、 肽键的生成（成肽）和 移位（转位）。 延伸过程所需蛋白因子称为延长因子(elongation factor, EF) 原核生物：EF-T (EF-Tu, EF-Ts) EF-G 真核生物：EF-1 、EF-2 （1）AA-tRNA与核糖体A位点的结合 （2）肽键形成 是由转肽酶/肽基转移酶催化 （3）移位 核糖体向mRNA3’端方向移动一个密码子。 需要消耗GTP，并需EF-G延伸因子 延长因子EF-G有转位酶( translocase )活性，可结合并水解1分子GTP，促进核蛋白体向mRNA的3侧移动 。 多聚核蛋白体(polysome) 蛋白质合成后加工和运转机制 主要包括 一）蛋白质前体的加工 1、N端fMet或Met的切除 2、二硫键的形成 3、特定氨基酸的修饰 4、切除新生肽链中非功能片段 2）二硫键的形成 mRNA中没有胱氨酸的密码子，蛋白质中的二硫键是通过两个半胱氨酸的-SH基氧化生成的 二）蛋白质合成抑制剂 1、翻译-运转同步机制 信号肽假说 ●信号肽：常指新合成多肽链中用于指导蛋白质跨膜转移的N-末端氨基酸序列（有时不一定在N端），长度一般在13~36个残基之间。 ●信号序列特点： （1）一般带有10-15个疏水氨基酸； （2）在靠近该序列N-端常常有1个或数个带正电荷的氨基酸； （3）在其C-末端靠近蛋白酶切割位点处常常带有数个极性氨基酸，离切割位点最近的那个氨基酸往往带有很短的侧链（丙氨酸或甘氨酸）。 复习体 1． 多数氨基酸都有两个以上密码子，下列哪组氨基酸只有一个密码子？ A．苏氨酸、甘氨酸 B．脯氨酸、精氨酸 C．丝氨酸、亮氨酸 D．色氨酸、甲硫氨酸 E．天冬氨酸和天冬酰胺 2．tRNA分子上结合氨基酸的序列是 A．CAA-3′ B．CCA-3′ C．AAC-3′ D．ACA-3′ E．AAC-3′ 3．遗传密码 A．20种氨基酸共有64个密码子 B．碱基缺失、插入可致框移突变 C．AUG是起始密码 D．UUU是终止密码