高中生物必修一可溶性还原糖、脂肪、蛋白质的鉴定人教版资料.pptVIP

显微镜下的脂肪颗粒 * 【实验一】 生物组织中可溶性还原糖、脂肪、蛋白质的鉴定 【实验一】生物组织中可溶性还原糖、脂肪、蛋白质的鉴定 1、可溶性还原糖的鉴定原理 ： （1）生物组织中普遍存在的可溶性还原糖种类较多，常见的有葡萄糖、果糖、麦芽糖，分子内都含有游离的具有还原性的半缩醛羟基，因此叫做还原性糖； （2）用斐林试剂只能检验生物组织中可溶性的还原糖的存在与否。斐林试剂由质量浓度为0．1g/mL的氢氧化钠溶液和质量浓度为0．05g／mL的硫酸铜溶液配制而成，二者混合后，立即生成淡蓝色的Cu（OH）2沉淀。Cu（OH）2与加入的葡萄糖在加热的条件下，能够生成砖红色的Cu2O沉淀 （3）用斐林试剂鉴定可溶性还原糖时，溶液的颜色变化过程为：浅蓝色—棕色—砖红色（沉淀）。 【实验原理】 2、蛋白质的鉴定原理 （1）鉴定生物组织中是否含有蛋白质时，常用双缩脲法，使用的是双缩脲试剂。双缩脲试剂的成分是质量浓度为0．1g/mL的氢氧化钠溶液和质量浓度为0．01g／mL的硫酸铜溶液。在碱性溶液（NaOH）中，双缩脲（H2NOC-NH-CONH2）能与铜离子作用，形成紫色或紫红色的络合物，这个反应叫做双缩脲反应。由于蛋白质分子中含有很多与双缩脲结构相似的肽键，因此，蛋白质都可与双缩脲试剂发生颜色反应。 3．脂肪鉴定的原理： 苏丹III染液遇脂肪的颜色反应为橘黄色，苏丹IV染液遇脂肪的颜色反应为红色。 4、淀 粉的鉴定：淀粉遇碘变成蓝色。 要用高倍显微镜观察 无需加热、但A液和B液要分开使用、先加A液、后加B液 甲、乙液要现混合现用、还要50-65℃水浴加热 注意事项 蓝色 橘黄色 （红色） 紫色 砖红色沉淀 反应颜色 碘 苏丹III染液（苏丹IV染液） 双缩脲试剂 斐林试剂 试剂 淀粉 脂肪 蛋白质 还原糖 （葡萄糖、果糖、麦芽糖） 化合物 煮2分钟 还原糖的鉴定： 【实验步骤】 脂肪的鉴定： 先用低倍镜观察，后用高倍镜观察 染色2-3分钟 蛋白质的鉴定： 观察颜色变化 1．实验成功的关键在于实验材料的选择。 （1）可溶性还原糖的鉴定实验中，最理想的实验材料是含糖量较高的生物组织（或器官），而且组织的颜色较浅，或近于白色的。经试验比较，颜色反应的明显程度依次为苹果、梨、白色甘蓝叶、白萝卜。 （2）脂肪的鉴定实验中，实验材料最好选用富含脂肪的种子，且徒手切片要成功。 （3）蛋白质的鉴定实验，最好选用富含蛋白质的生物组织，植物材料常用的是大豆，动物材料常用的是鸡蛋白。 【实验成功的关键及注意事项】 （1）斐林试剂很不稳定，故应将组成斐林试剂的甲液（0．1g/mL的NaOH溶液）和乙液（0．05g/mL的CuSO４溶液）分别配制、储存，使用时，再临时配制，将4～5滴乙液滴入2mL甲液中，配完后立即使用。 （2）双缩脲试剂的使用，应先加试剂A（0．1g/mL的NaOH溶液），造成碱性的反应环境，再加试剂B（0．01g/mL的CuSO４溶液）。 （3）在蛋白质 的鉴定实验中，若用蛋白质作实验材料，必须稀释，以免实验后粘住试管，不易洗刷。 （4）在鉴定脂肪的实验中，若用花生种子作实验材料，必须提前浸泡3～4小时，浸泡时间短了，不容易切片，浸泡时间过长，则组织太软，切下的薄片不易成形，染色时间不宜过长。 【注意事项】 练习 1．用苏丹Ⅲ染液对脂肪组织进行染色时，可用来冲洗浮色的药品是（ ） A．HCl B．H２Ｏ C．50%的酒精 D．无水酒精 2．下列哪个实验用到显微镜（ ） A．可溶性还原糖的鉴定 B．蛋白质的鉴定 C．脂肪的鉴定 D．淀粉的鉴定 3．下列哪组试剂在使用过程中，必须经过加热（ ） A．斐林试剂鉴定可溶性还原糖的过程中 B．苏丹Ⅲ和苏丹Ⅳ染液在鉴定动物组织中的脂肪时 C．双缩脲试剂鉴定蛋白质时 D．碘化钾溶液鉴定淀粉时 4．某人做实验时，用了放置时间很久的蔗糖，结果，此对照试管加入斐林试剂后，也出现了砖红色沉淀，原因是（ ） A．蔗糖是还原性糖 B．蔗糖被淀粉酶分解成还原性糖 C．蔗糖放置久了，被微生物分解成为还原性糖 D．斐林试剂失效 C C A C 5．对斐林试剂和双缩脲试剂的配方，叙述不正确的是（ ） A．都含有NaOH溶液和CuSO４溶液 B．斐林试剂的配制是将4～5滴0．05g/mL的CuSO４溶液滴入2mL 0．1g/mL的NaOH溶液中即成 C．双缩脲试剂是将3～4滴0．01g/mL的CuSO４溶液滴入2mL 0