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第十章 吸光光度法 基于物质对光的选择性吸收而建立的分析方法称为吸光光度法，包括比色法、可见分光光度法、紫外分光光度法及红外光谱法等。本章重点讨论可见光区的吸光光度法。 有些物质的溶液是有色的，例如KMnO4水溶液呈紫红色，K2Cr2O7水溶液呈橙色。 许多物质的溶液本身是无色或浅色的，但它们与某些试剂发生反后生成有色物质，例如Fe3+与SCN-生成血红色配合物；Fe2+与邻二氮菲生成红色络合物。 有色物质溶液颜色的深浅与其浓度有关，浓度愈大，颜色愈深。 如果通过与标准色阶比较颜色深浅的方法确定溶液中有色物质的含量，则称为目视比色法； 如果使用分光光度计，利用溶液对单色光的吸收程度确定物质含量，则称为分光光度法。 第一节 概述 一、吸光光度法的特点 1、光的基本性质 光是一种电磁波，具有波粒二象性。 光的波动性：波长?、频率?、光速c等参数来描述： ? ? = c 在真空介质中光速为2.9979×108m·s-1，约等于3×108 m·s-1 光的折射、衍射、偏振和干涉等现象。 光的粒子性：(能量来描述) 光是由光子流组成，光子的能量： E = h? = hc/? （Planck常数：h=6.626×10-34 J·S ) 光电效应、光的吸收和发射等。 2. 物质对光的选择性吸收及吸收曲线 吸收曲线的讨论： 3、特点 a. 灵敏度高 常用于测定质量分数为10-2 ~ 10-5 的微量组分，甚至可测定低至质量分数为10-6~10-8的痕量组分。通常所测试的浓度下限达10-5~10-6mol·L-1。 b. 准确度高 一般目视比色法的相对误差为5%~10%，分光光度法为2%~5%。 c. 应用广泛 几乎所有的无机离子和许多有机化合物都可以直接或间接地用分光光度法进行测定。不仅用于测定微量组分，也能用于高含量组分的测定、络合物组成、化学平衡等的研究。 d. 仪器简单、操作方便、快速 近年来，由于新的、灵敏度高、选择性好的显色剂和掩蔽剂的不断出现，以及化学计量学方法的应用，常常可以不经分离就能直接进行分光光度测定。 二、光吸收的基本定律 1、朗伯—比尔定律 设入射光强度为I0，吸 收光强度为Ia，透射光强度 为 It，反射光强度为Ir，则： I0 = Ia + It + Ir 由于反射光强度基本相同，其影响可相互抵消，上式可简化为：I0 = Ia + It 应用朗伯－比耳定律时应注意： （1）朗伯-比耳定律不仅适用于有色溶液，也可适用于其他均匀非散射的吸光物质（包括液体、气体和固体）； （2）该定律应用于单色光，既适用于可见光，也适用于红外光和紫外光，是各类吸光光度法的定量依据； （3）吸光度具有加和性，是指溶液的总吸光度等于各吸光物质的吸光度之和。 根据这一规律，可以进行多组分的测定及某些化学反应平衡常数的测定。 摩尔吸光系数ε的讨论 三、比色法和吸光光度法及其仪器 （一）目视比色法 目视比色法是一种用眼睛辨别颜色深浅，以确定待测组分含量的方法。 一般采用标准系列法。即在一套等体积的比色管中配制一系列浓度不同的标准溶液，并按同样的方法配制待测溶液，待显色反应达平衡后，从管口垂直向下观察，比较待测溶液与标准系列中哪一个标准溶液颜色相同，便表明二者浓度相等。 如果待测试液的颜色介于某相邻两标准溶液之间，则待测试样的含量可取两标准溶液含量的平均值。 1、基本组成 2.单色器 棱镜：依据不同波长光通过棱镜时折射率不同 光栅：在镀铝的玻璃表面刻有数量很大的等宽度等间距条痕(600、1200、2400条/mm )。 3. 样品室 练习题 (1)人眼能感觉到的光称为可见光，其波长范围是( ) A 400~780nm B 200~320nm C 200~780nm D 200