第13章-1 蛋白质合成5(郭蔼光主编配套课件).pptVIP

蛋白质的生物合成;13.1 蛋白质合成体系;〔目的与要求〕：;13.1.1 mRNA与遗传密码; mRNA (messenger RNA)：蛋白质生物合成过程中直接指令氨基酸掺入的模板，是遗传信息的载体。;原核生物的多顺反子;mRNA分子上以5‘→3’方向，从AUG开始每三个连续的核苷酸(三联体)组成一个密码子(codon) 。;⑵遗传密码的破译的三个实验; 第二个实验是1964年也是由美国的M.Nirenberg等人完成的。他们首先合成一个已知序列的核苷酸三聚体，然后与大肠杆菌核糖体和氨酰tRNA一起温育。由此确定与已知核苷酸三聚体结合的tRNA上连接的是那一种氨基酸。该实验对于几种密码编码同一个氨基酸提供了直接的、最好的证据（下图B）。 利用核酸的人工合成、核糖体结合技术;核糖体结合技术; 第三个实验是1965由Jones,Khorana等人完成的。他们利用有机化学和酶法制备了已知的核苷酸重复序列，以此多聚核苷酸作模板，在体外进行蛋??质合成，发现可以生成三种重复的多肽链（下图C）。 若从A翻译，则合成出多聚Ile，即AUC对应Ile； 若从U翻译，则合成出多聚Ser，即UCA对应Ser； 若从C翻译，则合成出多聚His，即CAU对应His。 因为体外合成是无调控的合成，可以随机地从A、或U、或C翻译，所以有三种重复的多肽链生成。;Date;U;;AUG是起始密码子，也是Met(或fMet)的密码子。 原核和真核生物肽链合成的第一个氨基酸都是Met(或fMet)；少数细菌中也用GUG做为起始码(起始位点编码fMet，密码表中编码Val)。真核生物偶尔也用CUG作起始蛋氨酸的密码。 密码子UAA、UAG、UGA 是肽链成的终止密码子，不代表任何氨基酸，也称无意义密码子。 现代研究发现终止密码子也可编码氨基酸： No21：UGA：硒-半胱氨酸 No22：UAG：吡咯-赖氨酸;2. 连续性 (commaless); 基因损伤引起mRNA阅读框架内的碱基发生插入 或缺失，可能导致框移突变(frameshift mutation)。 ;3. 简并性 (degeneracy);4.通用性 (universal);6.变偶性或摆动性(wobble);“摆动假说”认为：碱基间除标准配对外，还可以有非标准的配对。; 反密码与密码碱基配对时的摇摆现象;功能：主要起转运氨基酸的作用。由于tRNA分子的同工性，细胞内tRNA的种类比氨基酸的种类多。 MW 25～30kD，沉降常数约4S，约80个核苷酸组成，含有大量稀有碱基，如ψ、DHU,各种甲基化的嘌呤和嘧啶核苷等。原核和真核细胞1个tRNA分子一般有10～15个稀有碱基。 tRNA中有15～16个核苷酸的种类和位置不变，为固定核苷酸，其它的为可变核苷酸。;TψC环；由7个碱基组成，参与tRNA与核糖体表面的结合。 ;额外环或可变环( extro variable loop)。碱基种类和数量(3～18个碱基)高度可变，并富含稀有碱基。 反密码子环(anti-cordon loop)。由7个碱基组成，处于中间位的3个碱基为反密码子。反密码子可与mRNA中的密码子结合。毗邻反密码子的3‘端碱基往往为烷化修饰嘌呤,其5’端为U,即：U-反密码子-修饰嘌呤。 二氢尿嘧啶环(D-loop)由8～12个碱基组成，含有2±1个修饰的碱基(D)。 倒L中反密码子环和二氢尿嘧啶环参与识别氨酰-Trna 倒L中TψC环参与核糖体;tRNA的三维结构呈倒“L”形。 氨基酸接受臂CCA序列和反密码子处于倒L的两端。 D环和TψC环形成倒L的角。不同tRNA倒L形的角有轻微改变，允许tRNA执行不同功能时改变其功能。;起始tRNA：蛋白质生物合成过程中，特异识别mRNA上起始密码子tRNA 延伸tRNA：参加多肽链合成的起始。在多肽链延伸中运载氨基酸的tRNA。 ;核糖体分两类： 一类核糖体附着于粗面内质网,参与分泌性蛋白质的合成； 另一类游离于胞浆，参与细胞固有蛋白质的合成。;13.1.3.1 核糖体的组成;组成核糖体的rRNA为单股链，可自行折叠形成螺旋区和环区，所有螺旋区的碱基都是保守的； 所有来源rRNA均能形成4个结构域(Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ)，每个结构域均含许多茎和环，它们通过无距离碱基对的相互反应彼此靠近； 绝大多数rRNA碱基的特异功能尚不清楚。可能rRNA中不配对碱基涉及到rRNA与其它RNA的结合，如16S的3端不配对碱基与mRNA的起始部位(SD顺序)形成碱基配对。 ;①核糖体蛋白：与rRNA或核糖体亚基紧密连接的蛋白。 如E.coli 30S亚基上的21种蛋白质及50S亚基上的34种