雷公藤内酯醇对大鼠海马内注射β淀粉样蛋白后drebrin和cofilin表达的影响.pdf

摘要 摘 要 目的： 阿尔茨海默病（Alzheimer’s disease，AD）的发病机制至今仍未完全明了， 近年来，AD 的免疫炎症学说受到了越来越多的关注。雷公藤内酯醇是我国独创 的一种具有抗炎、免疫抑制作用的药物。大量的研究表明，雷公藤内酯醇具有 明确的神经保护作用。我们的前期工作也显示，雷公藤内酯醇可以缓解 AD 模型 大鼠海马神经元树突棘的退化。树突棘的主要细胞骨架成分是肌动蛋白，树突 棘形态的改变是通过树突棘内肌动蛋白的重排而实现的。肌动蛋白的重排主要 受肌动蛋白结合蛋白的调节，发育调节脑蛋白（developmentally regulated brain protein，drebrin）和丝切蛋白（cofilin）是调节树突棘形态的两个主要的肌动蛋 白结合蛋白。本实验观察雷公藤内酯醇对 AD 模型大鼠海马神经元 drebrin 和 cofilin 表达的影响，从树突棘结构重塑的角度来探讨雷公藤内酯醇对 AD 的作用 机制。 方法： 1、45 只 SD 雄性大鼠等分成对照组、模型组、用药组。大鼠右侧海马内一 次性注射凝聚态 Aβ1－40 设为模型组，大鼠右侧海马内注射等量生理盐水设为对 照组，用药组大鼠在右侧海马注射凝聚态 Aβ1 －40 后腹腔注射雷公藤内酯醇 0.4mg·kg-1，共 15d。 2、Golgi 染色用于检测各组大鼠海马神经元树突棘密度的变化。 3、免疫组织化学染色用于检测各组大鼠海马神经元 drebrin 和 cofilin 表达 的变化。 4、RT-PCR 用于检测各组大鼠海马神经元 drebrin mRNA 和 cofilin mRNA 表 达的变化。 结果： 1、Golgi 染色结果显示，对照组大鼠海马神经元树突棘数量多而密集，模 型组大鼠海马神经元树突棘密度明显低于对照组（P＜0.01），用药组大鼠海马神 经元树突棘密度明显高于模型组（P＜0.05）。 2、drebrin 免疫组???化学染色结果显示，和对照组相比，模型组大鼠海马 II 万方数据 摘要 drebrin 免疫反应阳性细胞数量明显减少（P＜0.01），平均光密度明显降低（P＜ 0.01）；用药组大鼠海马 drebrin 免疫反应阳性细胞数量较模型组明显增多（P＜ 0.05），用药组大鼠海马 drebrin 免疫反应阳性细胞平均光密度较模型组略有升高， 但无统计学意义（P＞0.05）。 3、cofilin 免疫组织化学染色结果显示，与对照组比较，模型组大鼠海马 cofilin 免疫反应阳性细胞数量明显增多（P＜0.01），平均光密度明显升高（P＜0.01）； 与模型组比较，用药组大鼠海马 cofilin 免疫反应阳性细胞数量明显减少（P＜ 0.05），平均光密度明显下降（P＜0.01）。 4、drebrin RT-PCR 检测显示，模型组大鼠海马 drebrin mRNA 的表达明显低 于对照组（P＜0.01）；用药组大鼠海马 drebrin mRNA 的表达明显高于