10-神经营养因子.ppt

10 神经营养因子G. Yu01-14-2004;第一节 总论 1．细胞因子：cytokine 细胞内存在分泌的 生物活性大分子，大多数为多肽 2．表达：防卫，刺激 3．种类： 50 4．功能: 神经, 免役, 血液系统调控; 5．与靶细胞结合方式: a. 受体结合: ex. 白细胞介素 b. 可溶性受体结合:  c. 与携带蛋白结合: ex. α2巨球蛋 白+ IL-1, IL-6 d. 与细胞外基质结合 ;图 10-1;一、 神经营养因子的种类：neurotrophic factor, NTF;二、 细胞因子的功能特点 1． 多功能性：一种因子→ 不同靶细胞 → 相似、不同效应， ex. IL-6 →免疫 应答、造血 2． 协同功能：ex. IL-6 与 PDGF、DGNF、 FGF→ 共同促进神经再生 3． 自分泌、旁分泌：autocrine, paracrine;表 10-2 ;第二节 神经因子各论;一般介绍： 1972年发现、构成一个家族 1． NGF 基因： a. 发现： 依据小鼠βNGF的aa→ 探针→ cDNA→人类cDNA… b. 组成： 45 kb, 6 exon, 5 intron, cDNA1029 bp;图 10-2;2． NGF氨基酸序列： a. 高度同源： 鼠-人 b. 抗原不同：决定簇不同→ 无免疫交叉 反应 c. 基因产物：具有糖基化位点 Ａ产物：　３.４ｋＤ前体，-187起点 的70 aa信号肽 B产物：2.7 kD前体， -121起点的信 号肽;3． NGF的基因工程 a. 原核细胞表达：无进展，二硫腱错接， 肽键折叠 b. 真核细胞表达：15-40μg/l;4. hGNF受体（hGNFＲ）以及基因：高－低亲和 受体两类 a. 结构： 25 kb，6 exon b. 28 aa 信号肽  c. 膜外区：C末端、前３exon, 160 aa 构成40 aa的4个重复结构，保守结构为6 半胱氨酸+富含苏/丝氨酸序列 d. 膜区：４exon, 22 aa， e. 胞浆区：5-6 exon, 155 aa, ;5. 生长因子受体（hNGFR）的表达：  A. 方法：编码hNGFR→导入成纤维细 胞→ 表达低亲和力受体 B. NGFR缺失PC12细胞系→两类受体表 达 C. 推测： 同源一类基因 D. 过程：NGFA +NGFR→ 复合物进入 细胞→ 溶酶体降解NGF、再循环→ 效应…;图 10-3;6． NGF的生物学效应 A. 效应细胞：表达NGF受体→　生物学 效应细胞 B. 周围：交感神经元，嗜铬细胞，感觉 神经的背根细胞三叉半月节 C. 中枢：胆碱神经原 D. 功能： 神经原存活;7． NGF在发育和成年期的变化： A. 发育期：发育逐渐增加→　出生下降 恒定至成年 B. 功能： a) 诱导神经原定向生长 b) 控制数量 c) 刺激胞体、树突发育 d) 影响密度 e) 促进分化 Ｃ.　成年：下降但依赖;8. NGF与疾病： A. 切断胆碱纤维→ 神经原死亡 B. 注射NGF→ 恢复 C. NGF与老年痴呆： 发挥治疗效应;二、 白细胞介素6： interleukin-6, IL-6 简介： 1. 生成细胞： 淋巴，非淋巴细胞 2. 多肽 3. 免疫应答， 造血， 神经生长分 化…;4. 家族成员： a) 睫状体神经营养因子（ ciliary neurotrophic factor, CNTF） b) 白血病抑制因子（leukemia inhibitor factor,LIF） c) 抑癌因子（oncostatin） d) 心肌营养因子1（ cardiotrophin-1, CT-1） e) 促生长活性因子（growth promoting activity, GPA） f) IL-6， IL-11;5． 家族特征： a) 20-23 kD b) 30% aa同源 c) 共同具有相似3级结构：４反平行α 螺旋组成 d) 多功能性;（一） IL-6的基因结构 A. 5kb B. 5 exon, 4 intron C. 定位： 7 p 21 D. cDNA：1.1kb,  E. 受体分类： 高，低亲和力， 468aa;(二) IL-6信号传导  1. 配体+受体→ + gp130形成二聚体→ JAK家族落氨酸激酶↑→激活“激活信 号蛋白和转录因子（signal transducers