遗传学大实验.ppt

遗传学综合大实验主要内容;第一天安排;第二天安排;蚕豆多倍体诱导;脱氧核糖核酸（DNA）的测定;四、实验步骤 取固定后的蚕豆根尖放入小药瓶中，在60℃1N HCl中水解5～12min，再放入冷1N HCl 处理1min。（以不处理作对照） 将1N HCl倒掉水洗3次后吸干，放入脱色碱性品红，用黑纸包住药瓶，放在暗处(防氧化)染色反应3～5hr。 倒掉染液，用SO2溶液冲洗3次，每次1min。 倒掉SO2液，加H2O。 取根尖顶端（紫红色部分）,放在载玻片上，再用另一载玻片呈十字形压片，分开后滴上45%醋酸液1滴。加盖片，用吸水纸吸掉多余溶液。 显微镜下观察，选染色较深，细胞呈薄层分散的临时片，鉴定染色反应的效果与部位。;临时片的制作;永久片制作方法;脱水、透明：取三只培养皿，分别编号②、③、④，在其中各放入一根短粗玻璃棒，顺序加入下列脱水剂：②号培养皿加2份95%酒精+1份正丁醇；③号培养??加1份95%酒精+2份正丁醇；④号培养皿加正丁醇。操作时用鸭嘴镊子把①号培养皿中已脱落的盖玻片和载玻片取出，稍干后迅速放入②号培养皿中，依次脱水、透明，最后放入④号培养皿中。在各编号培养皿中分别浸泡5min左右。整个脱水过程中，必须保持载玻片和盖玻片原来相对的方向和位置，同时注意操作轻巧，以免造成玻片上材料漂失。 ;封片：从④号培养皿中取出载玻片和盖玻片置于滤纸上吸去多余的溶剂，在载玻片中央载有材料处滴上1小滴中性树胶，将盖玻片盖回原来位置进行封片。覆盖盖玻片时，要注意用鸭嘴镊子夹住盖玻片，轻轻地倾斜覆盖，使之随着树胶的扩展自然下滑，切不可施加压力或移动盖玻片。如发现封片中树胶有气泡，应让其自行逸出或用针尖烧热后烫一下，使气泡逸出。如果树胶滴得过多溢出玻片四周，应待树胶晾干后，用脱脂棉蘸二甲苯轻轻擦净溢出的树胶。封片后平放晾干，进行镜检，物象清晰符合要求的保存,并贴上标签,注明标本名称、作者姓名和制片日期。 ;断片