微生物基本知识幻灯片.pptVIP

微生物基础知识 川宁生物 一、微生物的概念 通常是指一类体积微小、结构简单，大多为单细胞，必须借助光学显微镜放大千倍或电子显微镜放大数万倍才能肉眼可见的一类微小生物的统称。 二、微生物的发现 真正看见并描述微生物的第一个人是荷兰商人安东·列文虎克(Antony Van Leeuwenhoe k, 1632～1723)，他利用自制的显微镜发现了微生物世界(当时被称之为微小动物)，他的显微镜放大倍数为50～300倍，构造很简单，利用这种显微镜，列文虎克清楚地看见了细菌和原生动物 。首次揭示了一个崭新的生物世界--微生物界。 三、微生物的分类 按照有无细胞及细胞组成结构不同，可将微生物分为三种细胞类型 原核细胞型 真核细胞型 非细胞型 (一)原核细胞型 即原核生物（procaryotes） 它们由单细胞组成，没有典型的核，无核仁核膜，单个染色体，仅有裸露的DNA，不能有丝分裂，没有细胞器，70S核糖体游离在胞浆中，细胞壁由肽聚糖组成。 如：细菌、放线菌、螺旋体、支原体、衣原体、立克次体等。 (一)原核细胞型 金黄色葡萄球菌 结核杆菌 大肠杆菌 (一)原核细胞型 螺 旋 体 立 克 次 氏 体 衣 原 体 支原体 (二)真核细胞型 即真核生物(eucaryotes)。 大多数为多细胞，少数为单细胞，具有典型的细胞核结构，即有核膜和核仁，多个染色体由DNA与组蛋白组成，有线粒体、内质网等细胞器，通过有丝分裂进行细胞分裂。细胞壁由纤维素、几丁质构成。 例如：真菌、原虫和单细胞藻类 (二)真核细胞型 曲霉 酵母菌 (三)非细胞型 无细胞结构，结构比原核生物更简单，即病毒。 一般由蛋白质外壳和核酸基因组组成，且仅含有一种核酸，DNA或RNA。其酶系统不完全，自身不能进行生长繁殖，必须寄生在活细胞内，以核酸复制方式增殖。 (三)非细胞型 艾滋病病毒模式 脊髓灰质炎病毒 四、微生物的菌落 单个 或少数菌体 2.特征： 大小、形状、光泽度、 颜色、透明度等。 3.功能： 1.定义： 鉴定菌种的重要依据 固体培养基上 大量繁殖 子细胞群体 五、微生物的实验室培养 （一）培养基 （二）微生物技术 1、常用的微生物接种方法 2、微生物的培养 3、菌种保藏 （一）培养基 概念：人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制出供其生长繁殖的营养基质。 分类： 固体培养基 —用于微生物的分离、计数、鉴定 液体培养基 —常用于工业生产 （一）培养基 （1）一般都含有水、碳源、和氮源、 无机盐等营养物质 （2）还需要满足微生物生长对pH、特殊营养物质 (例如生长因子即细菌生长必需，而自身不能合成的化合物,如维生素)以及氧气、渗透压等的要求 （一）培养基 制备培养基 1. 计算 2．称量 3．溶化 4．灭菌 5．倒平板 例子： 玫瑰红纳培养基 取本品30.5g，加纯化水1000ml，加热，溶解，煮沸，放置至温度达室温后，搅匀，分装至洁净、干燥的三角瓶，115℃30分高压灭菌，备用。 倒平板 约50℃ 防止皿盖上的水珠落入培养基，造成污染 灼烧灭菌， 防止瓶口的微生物污染培养基 问题探讨 1.培养基灭菌后，需要冷却到50 ℃左右时，才能用来倒平板。你用什么办法来估计培养基的温度？ 可以用手触摸盛有培养基的锥形瓶，感觉锥形瓶的温度下降到刚刚不烫手时，就可以进行倒平板了。 2.为什么需要使锥形瓶的瓶口通过火焰？ 通过灼烧灭菌，防止瓶口的微生物污染培养基。 （二）、微生物技术 ⑴平板划线法： 1.接种 ⑴、平板划线法： （2）菌种传代 （2）菌种传代 挑菌苔 接种 问题讨论 为什么在操作的第一步以及每次划线之前都要灼烧接种环？在划线操作结束时，仍然需要灼烧接种环吗？为什么？ 操作的第一步灼烧接种环是为了避免接种环上可能存在的微生物污染培养物 杀死上次残留的菌种，保证使下一次划线时，菌种直接来源于上次划线的末端，从而通过划线次数的增加，使每次划线时菌种的数目逐渐减少，以便得到菌落。 及时杀死接种环上残留的菌种，避免细菌污染环境和感染操作者。 （3）稀释涂布平板法： 101 102 103 104 105 106 a.梯度稀释菌液： （3）稀释涂布平板法： b.涂布平板： 滴稀释菌液 不超过0.1ml 各梯度分别涂布3个平板 1个不涂布作空白对照 不超过0.1ml 各梯度分别涂布3个平板 1个不涂布作空白对照 稀释菌液 稀释后菌液平皿计数 涂布平板的所有操作都应在火焰附近进行。结合平板划线与系列稀释的无菌操作要求，想一想，第2步应如何