周新宇 实验八.pptVIP

光学显微镜下细胞骨架的结构 试剂的配制 1．M一缓冲液：50mmol／L咪唑，50mmol／L kCl：，0.5 mmol／LMgCl2，lmmol／L EGTA(乙二醇双(a-氨基乙酸)醚四乙酸)，0．1mmoL／L EDTA，lmmol／L巯基乙醇或DTT(二硫苏糖醇)。 0.2％考马斯亮蓝R250，其溶剂是甲醇46.5ml，冰乙酸7ml，蒸馏水46.5ml。 3％戊二醛，用6mmol／L磷酸缓冲液(PH6．8)配制 模板来自于 * 植物细胞骨架的光学显微观察 实验八 实验目的 观察光学显微镜下细胞骨架的结构 了解显示植物细胞骨架的方法及其原理 洋葱内表皮细胞骨架 细胞内可见到被染成蓝色的粗细不等的分枝状结构，这便是细胞骨架 实验原理 细胞骨架是指在细胞中支持和连接细胞各组分，以及与细胞运动有关的结构 实验原理 试剂选用原因 3 M-缓冲液洗涤细胞，可以提高骨架稳定性 三、实验用品 2、器材 3、试剂 洋葱鳞茎 显微镜、50ml烧杯、滴管、容量瓶、载玻片、盖玻片、镊子。 ⑴ M-缓冲液 ⑵ 6mmol／L PH6．8磷酸缓冲液 ⑶ 1% Triton X-100 ⑷ 0.2%考马斯亮蓝 R250 ⑸ 3%戊二醛 （6）5％、7％、95％乙醇 （7）叔丁醇、正丁醇、二甲苯、树胶 四、实验方法 1、撕取 2、抽提 3、冲洗 4、固定 吸去缓冲液，用1%TritonX-100 处理洋葱表皮20-30 min。 取洋葱鳞茎内表皮细胞(约lcm2大小)若干片温于装有PH6．8磷酸缓冲液的50ml烧杯中，使其下沉。 吸去Triton X-100，用M-缓冲液洗3次，，每次10分钟 3％戊二醛固定0.5-1小时(对照组开始处理) 模板来自于 *