陈其军CRISPR-Cas-basedtoolkit研讨.pptxVIP

A?CRISPR/Cas-based Toolkit for Plant Multiplex Genome Editing, Multigene Interference, and Multigene Activation 陈其军 中国农业大学生物学院植物科学系 植物生理学与生物化学国家重点实验室 研究技术交流与分享 基因组编辑工具发展历史与现状 基因组编辑（Genome editing）或基因组工程（genome engineering）或基因打靶（Gene targeting） 历史 1993年前ZFN就已开始出现，迄今已发展了20多年才有今天的成就； 2009年底出现的TALEN似乎一夜之间呈现出取代ZFN的架势； 2012年底CRISPR/Cas已显现出取代TALEN的巨大潜力，在2013年成为现实。 荣誉 2011年：ZFN， TALEN和Meganuclease—2011年度方法（Nature Methods） 2012年：TALEN — 2012年十大突破（Science） 2013年～：CRISPR/Cas被认为是诺贝尔奖级别的成果，华人科学家张峰已因此获得生物医学大奖。 基因组编辑工具的应用 基因组巡航导弹，分子剪刀，DNA外科医生 定点突变，定点修饰（包括得到转基因），转录调控 基因治疗（如遗传病） 2013年CRISPR/Cas研究论文 Science：2篇（同时发表） Nature Biotech： 8篇【其中5篇（包括植物方面3篇）同时发表】； Cell：4篇 Nature Methods：3篇 Cell Research：4篇【其中植物方面2篇】 PNAS：1篇 2013年植物CRISPR/Cas研究论文 Shan,?Q.,?Wang,?Y.,?Li,?J.,?Zhang,?Y.,?Chen,?K.,?Liang,?Z.,?Zhang,?K.,?Liu,?J.,?Xi,?J.?J.,?Qiu,?J.?L.,?and?Gao,?C.?(2013)?Targeted?genome?modification?of?crop?plants?using?a?CRISPR-Cas?system.?Nat.Biotechnol.?31:686-688.【水稻/小麦；非双元载体】 Li,?J.?F.,?Norville,?J.?E.,?Aach,?J.,?McCormack,?M.,?Zhang,?D.,?Bush,?J.,?Church,?G.?M.,?and?Sheen,?J.?(2013)?Multiplex?and?homologous?recombination-mediated?genome?editing?in?Arabidopsis?and?Nicotiana?benthamiana?using?guide?RNA?and?Cas9.?Nat.Biotechnol.?31:688-691.【拟南芥/烟草】 Nekrasov,?V.,?Staskawicz,?B.,?Weigel,?D.,?Jones,?J.?D.,?and?Kamoun,?S.?(2013)?Targeted?mutagenesis?in?the?model?plant?Nicotiana?benthamiana?using?Cas9?RNA-guided?endonuclease.?Nat.Biotechnol.?31:691-693.【烟草】【上述3篇文章同时发表】 Feng,?Z.,?Zhang,?B.,?Ding,?W.,?Liu,?X.,?Yang,?D.?L.,?Wei,?P.,?Cao,?F.,?Zhu,?S.,?Zhang,?F.,?Mao,?Y.,?and?Zhu,?J.?K.?(2013)?Efficient?genome?editing?in?plants?using?a?CRISPR/Cas?system.?Cell?Res.【拟南芥/水稻】 2013年植物CRISPR/Cas研究论文 Xie,?K.?and?Yang,?Y.?(2013)?RNA-guided?Genome?Editing?in?Plants?Using?A?CRISPR-Cas?System.?Mol.Plant.【水稻】 Mao,?Y.,?Zhang,?H.,?Xu,?N.,?Zhang,?B.,?Gao,?F.,?and?Zhu,?J.?K.?(2013)?Application?of?the?CRISPR-Cas?System?for?Efficient?Genome?Engineering?in?Plants.?Mol.Plant.?【拟南芥/水稻】 Miao,?J.,?Guo,?D.,?Zhang,?J.,?Huang,?