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课程设置内容第一章概论第二章称量移液及高压灭菌第三章样品存贮及相关设备第四章离心技术及离心机第五章PCR基因扩增仪第六章光谱分析技术及相关仪器第七章电泳技术及电泳仪第八章生物安全及相关仪器第九章细胞培养技术及培养箱第十章显微技术及显微镜第十一章流式细胞技术及流式细胞仪第十二章DNA序列分析及测序仪第十三章蛋白纯化技术及其相关仪器第十四章色谱分析技术及色谱分析仪器第十五章免疫印迹技术–施孟如第十六章实验室安全及管理仪器的常用性能指标灵敏度;误差;噪音;最小检测量;精确度;可靠性;重复性;分辨率;测量范围和示值范围;线性范围;响应时间;频率响应范围。仪器维护正确使用环境要求电源要求定期校验做好记录1.正确使用操作人员应认真阅读操作说明书,严格按照操作规程掌握正确的使用方法,使仪器始终保持良好运行状态。要重视配套设备、设施的使用和维护检查,比如气体发生器、钢瓶、电源、水源系统等,避免仪器在工作状态发生断气、断电、断水情况。2.环境要求实验室清洁工作是仪器维护保养中的一件不可或缺的重要工作,做到每次使用完毕及时做好清洁维护工作;为保证仪器的精度和延长其使用寿命,应让仪器始终处于符合要求的温、湿度环境中;要确保精密仪器远离腐蚀源,平时应注意做好环境监察工作。3.电源要求良好的稳定供电对于检验仪器的精度和稳定性极为重要。应保证供电电源的电压稳定、波形失真小和具有正确良好的接地等。大型仪器应做到单独深埋接地并具有良好的抗干扰措施,比如采用隔离变压器等以保证仪器的灵敏度和可靠性。4.定期校验应当按照仪器说明书提供的方法和标准(图谱)对仪器定期进行校验,以保证测量结果的准确可靠。5.做好记录应该认真做好仪器的工作记录。内容包括仪器状态、开机或维修时间、操作维修人员、工作内容及其他值得记录备查的内容。一方面可为将来的统计工作提供充分的数据,另一方面也可掌握某些需定期更换的零部件的使用情况,有助于辨别是正常消耗还是故障。仪器的进展与发展趋势2.二十世纪初,由于电子管的发明及电子学的蓬勃发展,促进了近代医学科学和自动化理论与实践的飞速发展。3.随着晶体管的发明,数字化技术进展迅速,各种模拟—数字转换技术日趋成熟。从20世纪50年代到60年代中期,一大批数字式检验仪器开始应用于临床检验。例如,生化分析仪就从单通道连续流动式发展成了多通道连续流动式自动分析仪。4. 20世纪70年代,随着大规模集成电路制造技术的发展,发明了微处理器芯片。美国开始制售配微型计算机的检验、分析仪器产品。从1975年代起,微处理器和微型计算机在各种检验、分析仪器中的应用以平均每年35%的速度递增。到20世纪90年代,由计算机系统控制的多通道的自动化分析仪,随机任选式的、大型的、微机化的全自动生化分析仪等已在中等以上的医院普及应用。5.目前,大多仪器已具备超微量分析的能力,检测全程由计算机控制,其智能化、自动化、一机多能化程度更高,许多仪器都集大型机的处理能力和小型机的应变能力于一身。6. 进入21世纪后,检验仪器技术更新快、高科技含量增长迅猛,正向自动化、智能化、一机多能化方向发展。实验室安全与管理2.生物安全柜的使用生物安全柜的使用生物安全柜内感染性材料溢洒的处理当发生少量溢洒时,应用吸收纸巾立即处理,并立即用浸满消毒液的毛巾或纱布对生物安全柜及其内部的所以物品进行擦洗。工作面消毒后应更换手套,不论是摘下手套还是更换手套都要洗手。若发生大量溢洒,液体会通过生物安全柜前面或后面的格栅流到下面去,生物安全柜内所有的物品都应该进行表面消毒并拿出生物安全柜,在确保生物安全柜的排水阀被关闭后,可将消毒液倒在工作台面上,使液体通过格栅流到排水盘上。所有接触溢出物品的材料都要进行消毒和/或高压灭菌处理。4.离心机的使用按照手册操作;离心机放置的高度合适;离心前检查离心管破损、腐蚀或细微裂痕;用于离心的试管和标本容器盖紧;生物安全柜内正确平衡、密封和打开;离心管的液体容积应适当;使用后,清除离心桶、转子和离心机腔的污染。6.危险化学品酒精—酒精灯易燃烧手乙醚—冰箱爆炸、麻醉液氮—液氮罐烫伤DTT—呕吐聚丙烯酰胺—神经毒甲醛、EB、叠氮钠、DAB—致癌SDS、Triton X-100 、H2O2—灼伤酸、碱—腐蚀性丙酮—肝、肾损伤、神经毒二甲苯—肝、肾损伤、神经毒RNAi —别干扰了自己!!!病原微生物实验室的有关概念一、生物学相关概念1. 生物因子(剂)(bio-agents): 具有一定生物活性的制剂2. 微生物(microbes, microorganisms): 微生物是指活的生物因子,包括能够复制或基因物质传递的细胞或非细胞的微小生物实体,其中包括致病和非致病的微生物。主要指细菌(螺旋体、立克次体、衣原体)、真菌、病毒和某些寄生虫。3. 病原体(pathogens): 病原体是能致病
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