医院物体表面及医务人员手采样,刘奔华6.8试题.pptVIP

医院物体表面及医务人员手采样 一 、医院物体表面及医务人员手采样的意义 1. 引起医源性感染的因素很多, 物体表面及医务人员手可以充当医源性感染的媒介, 手的微生物污染是造成医院感染的最直接的传播途径,由于医务人员的手传播细菌而造成的医院感染约占30%。医护人员做好手的清洁消毒是控制医院感染重要措施一。 2. 一些物体表面清洁后的效果监测需要通过环境物表采样培养数据来反映。 3. 促进医务人员手卫生的依从性。 4. 进行流行病学调查。 二 、 物体表面采样 医院物体表面采样的对象：一切与医疗活动相关的物体表面均可以作为采样的对象：治疗台，治疗车，器械车、器械台、麻醉机、新生儿暖箱、诊疗仪器，床头柜、床尾桌、监护仪按钮、诊疗仪器操作把手、血压计袖带 、听诊器、床栏、床栏按钮、遥控器、门把手、电脑键盘、鼠标，电话机、病历夹等。 采样时间 常规：消毒处理后进行采样 暴发流行：未处理表面，随机采样 采样面积： 常规： ＜ 100cm 2 , 全部表面；≥100 cm 2 ，取100 cm 2 暴发流行： 不限，尽可能多采 采样方法： （1）棉拭子法 ： ① 准备材料 5 cm×5cm标准灭菌规格板： 材质为牛皮纸或不锈钢，中间为一 5cm×5cm正方形空格，面积是25 cm 2 。 采样液：无菌磷酸盐缓冲液或无菌生理盐水10 mL（如果有残留消毒剂，应加相应的中和剂）；无菌棉签；酒精灯等。 磷酸盐缓冲液（PBS，0.03mol/L,pH7.2） 配方 无水磷酸氢二钠 2.83g 磷酸二氢钾 1.36g 蒸馏水加至 1000ml，待完全溶解后，调 pH 至 7.2-7.4 ， 于 121℃ 压 力 蒸 气 灭 菌 20min备用。 ② 采样步骤 平面物体：用5cm×5cm的标准灭菌规格板,放在被检物体表面,用浸有无菌磷酸盐缓冲液（0.03mol/L）或生理盐水采样液的棉拭子1支, 在规格板内横竖往返各涂抹5次（并随之转动棉拭子，连续采样1-4个规格板面积）,剪去（或用酒精灯烧断）手接触部分, 将棉拭子放入装l0mL采样液的试管中送检。 对小型物体及不规则物体表面，如水龙头、门把手等，直接用棉拭子涂抹物体，用cfu/件表示 ③ 标本接种： a 涂抹法：充分震荡采样管后，用无菌吸管吸取0.5mL待检样品接种于营养琼脂平皿，置36℃±1℃培养箱培养48小时，计数并鉴定细菌。 b 倾注法：充分震荡采样管后，先取采样液1.0mL加到无菌空平皿，再将冷却至40℃～45℃的熔化营养琼脂培养基每皿倾注15mL～20mL，36℃±1℃培养箱培养48h,计数菌落数并鉴定细菌 ④ 注意事项： a 采样管充分震荡 b 涂抹法：充分涂抹开 c 倾注法：控制好琼脂温度，摇匀。 ⑤ 结果的报告及计算 细菌计数按cfu/cm 2 报告 小型物件物体表面的结果计算，用cfu/件表示 如果36℃±1℃培养箱培养48小时，无细菌生长，可报告为： 0cfu/cm 2 例1 ：棉拭子法对患者床头柜采样（采样面积100 cm 2 ），用上述涂抹法接种,（采样液10mL，接种量0.5mL），36℃±1℃培养箱培养48小时后培养基上生长的细菌菌落数为25个。 例2：棉拭子法对患者床头柜采样（面积100 cm 2 ），用上述倾注法接种（采样液10mL，接种量1mL），36℃±1℃培养箱培养48小时后培养基上生长的细菌菌落 数为10个。 (2) 压印法 ：用细菌定量采样皿对物体表面直接压印采样并培养计数。 ① 准备材料：面积25cm 2 的营养琼脂平皿（既是采样皿，又是培养皿） ② 琼脂平皿的制备及结果判定后平皿的处理 制备： 熔化营养琼脂培养基 平皿消毒灭菌：打开平皿盖，置于超净台的紫外线下照射60分钟，底的内面和盖 的 内 面 均 要 照 射 （ 或 环 氧 乙 烷 灭菌），在无菌采样皿中倒入营养琼脂培养基，加盖冷却凝固,置4 ℃冰箱备用。 注意：加营养琼脂培养基的量，要根据采样皿边沿具体厚度，培养基高度略高于平皿边缘 在琼脂没冷却前不要移动平皿，以免培养基溢出。 标本处理后平皿的处理：挑取琼脂，煮沸消毒，平板浸泡在消毒液中，然后冲洗晾干备用，制备培养皿时再紫外线照射。 ③ 采样操作： 面积25cm 2 的琼脂平皿压印物体表面10~20秒, 置36℃±1℃培养箱培养48h,计数菌落数并鉴定细菌。 ④ 结果计算 例：某治疗台面采样，36℃±1℃培养箱培养48h后, 4个平皿上的菌落数分别为14、25、25、36CFU 物体表面消毒合格标准判定：I、II类区域：物体表面的细菌菌落≤5cfu/cm 2 I、II类区域包括：洁净手术部，其他洁净场所，非洁净手术部，非洁净骨髓移