第八章 基因工程 (1)大肠杆菌噬菌体 (2)基因组DNA全长6.5kb(单链) (3)感染后,可复制成双链DNA(RF,DNA) (4)当RF→100—200后,只有(+)链复制 4种常用载体的比较 P146 表8—2 筛选:蓝白筛选 3、 M13噬菌体(M13 phage) 在受体细胞中表达(转录和翻译)外源基因的载体。 二. 表达载体(expressing vector) ㈠ 大肠杆菌表达载体 除克隆载体的特性外还含有: 表达系统元件 启动子 核糖体结合位点 克隆位点 转录终止信号 启动子:常用的有 trp-lac启动子(or tac启动子) ?噬菌体Pc启动子 T7噬菌体启动子 除含有原核序列:在E-Coli中的复制起始点、便于筛选的抗性基因 还包括真核表达元件 启动子/增强子 克隆位点 终止信号和加poly(A)信号 ㈡哺乳动物表达载体 原核受体 E-Coli受体系统 外源基因复制、扩
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