姜黄素对卵巢癌细胞EGFR表达和凋亡的影响.pdfVIP

目录 弓f言???????????????????????”????????·l 第一章材料与方法??????????????????????????3 1．主要试剂与材料??????????????????????????3 2．实验方法?????????????????????????????3 2．1主要溶液的配制?????????????????????????3 2．2细胞培养与实验分组???????????????????????3 2．3 RT—PCR检测EGFR的表达?????????????????????4 2．4 FCM检测细胞凋亡????????????????????????5 2．5统计学方法???????????????????????????6 第二章实验结果???????????????????????????7 1．SKOV3细胞一般形态观察??????????????????????7 2．各组SKOV3细胞EGFR基因表达情况?????????????????7 第三章讨论????????????????????????????10 第四章结论????????????????????????????13 参考文献?????????????????????????????14 综述(卵巢癌辅助治疗研究进展)???????????????????17 综述参考文献??????????????????????????···25 攻读学位期间的研究成果??????????????????????29 学位论文独创性声明、学位论文知识产权权属声明???????????30 青岛大学硕士学位论文 引言 卵巢癌是死亡率最高的妇科恶性肿瘤，严重威胁妇女的健康和生命，其缺乏典 型的临床表现及早期的筛查方法，60％-70％患者就诊时病灶已属晚期‘11，五年生存 率仍在30％左右。目前对卵巢癌的治疗原则是以手术为主，辅以化疗等综合治疗， 随着联合化疗方案广泛和标准化应用，化疗效果显著提高，但随之而来的肿瘤细胞 的耐药现象成为临床治疗的障碍，加之化疗副作用使部分患者痛苦不堪，为了进一 步提高卵巢癌患者的疗效，改善其生存质量，越来越多的学者开始探索更加安全有 效的抗卵巢癌药物。 姜黄素(Cur)是从中药姜黄中提取的一种植物多酚，化学分子式为C。。H。。06，其 结构主链由不饱和脂族及芳香族组成，易溶于溶于醋酸、乙醇、碱、氯仿等有机溶 剂，几乎不溶于水。对姜黄素的关注源于上世纪80年代，多项研究表明姜黄素具有 广泛的生物学功能，其中包括：抗氧化、清除自由基、抗炎、抗病毒、降血脂的作 用，保护缺血心肌治疗心肌梗死，此外姜黄素还可以抑制肿瘤细胞增殖，促进凋亡‘21， 越来越多的研究表明，姜黄素能有效抑制多种肿瘤细胞的增殖，其中包括：神经胶 质瘤、乳腺癌、肺癌、食管癌、卵巢癌等13-7|。国内学者李帆“1等经过研究得出结 论：姜黄素能通过抑制NF—K B的活性及阻滞细胞周期两种途径来有效地抑制卵巢癌 细胞3AO的增殖。另外有研究表明，姜黄素能抑制卵巢癌细胞Survivin基因的表达， 从而促进肿瘤细胞凋亡‘9’。有研究表明姜黄素衍生物对肝癌和宫颈癌有很好的细胞 毒性n01。 表皮生长因子(EGFR)是原癌基因的表达产物，它是一种N连接蛋白，具有酪 氨酸蛋白激酶活性，与相应配体结合后，可启动细胞生长周期，导致DNA合成增加， 刺激各种细胞生长和增殖。具有酪氨酸激酶活性。EGFR信号传导介导细胞生长、血 管生成及DNA的修复等， EGFR在表皮细胞、基质细胞、部分神经胶质细胞和平滑 肌细胞都表达。在多数实体瘤如乳腺癌、头颈癌、NSCLC、肾癌、和结肠癌细胞中 EGFR存在高表达。研究表明|11-12]EGFR在卵巢癌组织中高水平表达，其与病理分级 和临床分期密切相关，并且EGFR被认为是上皮性卵巢癌耐药的独立影响因素。近年 来随着分子生物学的发展有学者研究表明，EGFR信号传导系统与促进肿瘤细胞的增 殖、血管生成、粘附、侵袭和转移、抑制肿瘤细胞的凋亡并与肿瘤患者的不良预后 密切相关，有研究证实，EGFR酪氨酸激酶抑制剂能使非小细胞肺癌患者症状缓解， 生存期延长[z3l。 本实验将姜黄素、顺铂及姜黄素联合顺铂分别作用于人卵巢癌SKOV3细胞系， 青岛大学硕士学位论文 采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测各组SKoV3细胞EGFR基因的表达情况，用流 式细胞术(FCM)分析各组卵巢癌细胞的周期及凋亡率，旨在探讨姜黄素对人卵巢癌细 胞的影响及作用机制，为姜黄素的临床应用提供理论基础，亦为卵巢癌的药物辅助 治疗提供新思路。 2 青岛大学硕士学位论文 1、主要试剂与材料 1) 人卵巢癌细胞株SKOV3 2) 胎牛血清 3) RP