坤泰胶囊对小鼠种植窗期子宫内膜LIF、整合素β3与HOXA10表达的影响.pdfVIP

摘要 坤泰胶囊对小鼠种植窗期子宫内膜LIF、整合素133禾n HOXAIO表达的影响 研究生 朱桂杰 导师 谭丽教授 郑州大学第二附属医院妇产科生殖中心 河南郑州450014 摘 要 背景及目的 随着不孕症患病率的逐年增加，人类辅助生殖技术(assisted reproductive technology，ART)应运而生，为临床治疗不孕症开辟了新的领域，给不孕症患 者带来了新的希望。ART虽然经过三十余年的发展，但目前仍存在受精率高而 妊娠率低的现象。有研究发现，体外受精．胚胎移植(in vitro fertilization-embryo transfer，IVF．ET)术治疗失败的患者中约有2／3是由于子宫内膜容受性下降导 致的，因此为了达到高胚胎着床率和高妊娠率的目的，提高子宫内膜容受性是 必需的。子宫内膜容受性(endometrial receptivity)是指子宫内膜对胚胎的接受 能力。正常情况下，胚胎要想在子宫内膜中成功种植，只有在一个特定的时间 窗内完成，这一时期被称为“种植窗期(implantation window)”或“着床窗期 (nidation window)”，即人正常月经周期的20～24d，小鼠妊娠后4d，此时子宫 内膜对胚胎的接受能力达到最大。 目前的研究发现有多种调控因子参与胚胎的着床过程，其中最具代表性的 是白血病抑制因子(1eukaemia inhibitory factor，LIF)、整合素133(integfinl33)、 同源框基因A10(homeoboxAl0，HOXAlO)，其表达高峰出现的时间与子宫内 膜着床窗开放的时间相一致，并且它们的表达减弱、缺失或突变均可能导致不 孕，因此被认为是检测子宫内膜容受性的标志性分子。 超排卵和控制性超排卵(controlled ovarian hyperstimulation，COH)是ART 摘要 治疗中的重要步骤，但多项研究表明其可降低子宫内膜容受性，导致胚胎着床 障碍。如何改善子宫内膜容受性从而提高ART治疗的周期妊娠率成为生殖医学 领域亟待解决的问题。近年来多位学者致力于提高子宫内膜容受性的药物研究， 国内外主要集中在雌激素、小剂量阿司匹林、生长激素和中药方剂等方面，但 目前这些药物的应用还不能形成完全理想的子宫内膜环境，并且雌激素和阿司 匹林的安全性受到质疑，生长激素的价格昂贵，中药方剂有服用不方便、病人 依从性差等缺点，因此急需寻找到一种安全有效、服用方便、价格相对低廉的 药物来改善子宫内膜容受性。本研究即在此背景下，选取小鼠为研究对象，采 用免疫组化SP法观察坤泰胶囊对自然周期、超排卵周期和COH周期小鼠着床 期子宫内膜容受性相关因子LIF、整合素p3及HOXAl0表达水平的影响，探讨 其对改善子宫内膜容受性的作用及可能的机制，旨在为临床改善子宫内膜容受 性提供一种新的用药选择和理论依据。 材料与方法 将连续观察2个动情周期均正常的雌性小鼠随机分为6组(每组15只)： 对照组[生理盐水(NS)组(A组)】，NS+坤泰胶囊组(B组)，超排卵组(c 组)，超排卵+坤泰胶囊组(D组)，控制性超排卵(COH)组(E组)，COH+坤 泰胶囊组(F组)。参考有关文献，建立动物模型。各组小鼠均于妊娠第4天处 死，用免疫组化SP法检测子宫内膜中LIF、整合素p3和HOXAl0蛋白的表达 定位并进行半定量分析，所有数据均采用统计软件SPSSl7．0进行分析，两组定 量资料的比较采用两独立样本t检验；多组定量资料的比较采用单因素方差分 析，两两比较采用LSD—t检验；P0．05为差异有统计学意义。 结果 1、LIF蛋白和整合素p3蛋白的表达均主要定位在子宫内膜腔上皮和腺上皮 细胞的胞浆，间质细胞的胞浆少量表达。HOXAl0蛋白在腔上皮、腺上皮和问 质细胞的胞浆中均有表达。 2、小鼠着床期子宫内膜中LIF、整合素133、HOXAl0蛋白在NS+坤泰胶囊 组中的表达均高于对照组(P均O．05)，在超排卵+坤泰胶囊组中的表达均高于 超排卵组(P均0．001)，在COH+坤泰胶囊组中的表达均高于COH组(尸均 0．001)。 II 摘要 3、对照组小鼠着床期子宫内膜中LIF、整合素B3、HOXAl0蛋白的表达均 显著高于超排卵组(P均O．001)和COH组(P均0．001)，且三者在COH组 中的表达也明显高于超排卵组(P均O．05)。 4、对照组小鼠着床期子宫内膜中LIF、整合素D3、HOXAl0蛋白的表达量 仍明显高于超排卵+坤泰胶囊组(尸均O．001)和COH+坤泰胶囊组(P均O．01)， 且LIF、整合素p3在COH+坤泰胶囊组中的表达也明显高于超排卵+坤泰胶囊组 (P均O．01)。 结论 1、LIF、整合素[33、HOXAl0蛋白在着床窗期子宫