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核磁共振波谱技术与x射线衍射技术相比较 1.蛋白质三维结构测定 核磁共振可测量溶液样品，但更花时间和经费， 不是所有样品适合, 可互补。 2. 生物大分子之间的作用 x射线衍射技术由于得到弱相互作用的复合物晶体 困难，难以测定。复合物瞬时存在、不隐定，而 核磁共振技术很适合研究这类作用。 3.蛋白质动力学 核磁共振技术适于测量动态行为 　谢谢大家！ 空心阴极灯 高压直流电（300V）---阴极电子---撞击隋性原子---电离(二次电子维持放电)---正离子---轰击阴极---待测原子溅射----聚集空心阴极内被激发----待测元素特征共振发射线 应用 试样中的金属元素 空气中的汞 血清中的钙 18.3 电位分析法 电化学分析法 电位分析法 电位测定法 电位滴定法 伏安分析法测定电解过程中 电流-电压曲线的分析法 库仑分析法根据电解过程中 消耗电量来确定待测物质含量 电位测定法 利用电极电位与浓度的关系确 定物质含量 电位滴定法 较指示剂指示终点方法更好 用滴定中计量点前后电位突跃来确定终点 每滴一次测量一次电动势 作图确定终点 应用 酸碱滴定 pH玻璃电极作指示电极 氧化还原滴定 铂电极作指示电极 沉淀滴定 配位滴定 铂电极作指示电极 18.4 气相色谱法 色谱法 一种分离技术 色层法或层析法 物理分离分析法 根据混合物在互不相溶的两相中的分配系 数、吸附能力和作用性差异作为分离依据 由分离植物色素而得名 一相不动, 固定相 另一相混合物 流动相 分类 按流动相的状态分类 气相色谱法 气-固 气-液 液相色谱法 液-固 液-液 按固定相的形式分类 柱色谱 纸色谱 薄层色谱 气相色谱法的特点 高选择性 分离分析性相近的物质 高效能 同时分离和测定复杂多组分混合物 高灵敏度 10-9~10-11克物质 分析速度快 应用范围广 1. X射线单晶衍射分析法 (X-ray single crystal diffraction analysis) 测量生物大分子的结构 要求大的, 质量好的晶体 生物化学中的重要化学测试技术 蛋白质晶体数据库 Protein data bank PDB 2. 核磁共振分析法 核磁共振(nuclear magnetic resonance,NMR) 指核磁矩不为零的原子核，在外磁场的作用下， 核自旋能级发生塞曼分裂，共振吸收特定频率 的射频辐射的物理过程。 两次诺贝尔物理学奖、两次诺贝尔化学奖， 一次诺贝尔生理学医学奖。 在原子分辨率下测定溶液中生 物大分子三维结构的唯一方法 1)研究生物高分子及其复合物在溶液中的三维结构 和功能； 2)研究动态的生物大分子之间以及与配基的相互作用； 3)研究生物大分子的动态行为； 4)用固体核磁共振或液体核磁共振技术研究膜蛋白的 结构与功能； 5)研究蛋白质折叠、折叠动力学； 6)用于药物筛选与设计； 7)研究代谢组学； 8)研究活细胞中的蛋白质．蛋白质相互作用。 核磁共振波谱技术的具体应用： * * 第十八章 仪器分析方法 分析化学 化学分析 利用化学性质为基础的分析方法 仪器分析 利用物理或物理化学性质 为基础的分析方法 仪器分析法 因常需要使用 较特殊的仪 器而得名 光化学 分析法 原子光谱法 分子光谱法 X射线光谱法 核磁共振和顺 磁共振光谱法 色谱 分析法 样品作为化学电 池溶液的一部分 电化学 分析法 气相色谱法 高效液相色谱法 质谱法 记录分析离子按质荷比大小排列的谱 仪器分析法的特点 1.检出限量低 3.选择性好 直接测定某些复杂组成试样 2.分析速度快 4.准确度高 电解分析法 ?0.02% 5.用途广泛 6.设备投资费用高 18.1 吸光光度法 包括比色法 可见及紫外吸光光度法 及红外光谱法 重点讨论可见光区的吸光光度法。 基于物质对光的选择性吸收 而建立起来的分析方法， 光 一种电磁波具有波粒二象性 能量和波长的关系 E = h? = hc? = hc/? ? 频率 ? 波数 ? 波长 1012 1010 108 106 104 102 100 1020 1018 1016 1014 1022 ??射线 X射线 紫外 UV 红外 IR 微波 micro- wave AM FM 无线电 长波 可见光区 光谱 1665年牛顿 发现太阳光经三棱 镜形成光带 原子内层 电子跃迁 原子价电 子跃迁 分子转动振动 ? 频率/ Hz 波谱 分子运动吸收电磁波 X射线谱 电子光谱 红外光谱 核磁共振谱 近紫外 10~200nm 远紫外 200nm~400nm 可见光 400nm~750nm 红外 0.75~50 ?m 单色光 单一波长的光 复色光 不同波长的光组成