心脏骤停后延迟复苏对大鼠海马病理变化的影响.docVIP

心脏骤停后延迟复苏对大鼠海马病理变化的影响 　　[摘要] 目的 探讨心脏骤停后延迟心肺复苏对大鼠海马病理变化的影响。方法 成年雄性SD大鼠54只，随机分为假手术组（S组）、即刻复苏组（A组），延迟复苏组（B组），每组按血管穿刺后（S组）或自主循环恢复（ROSC）后（A组、B组）0.5 h断头取海马。A组、B组采用窒息法致大鼠心脏骤停和心肺复苏模型。光学显微镜下观察海马病理变化。结果 光镜下，S组海马神经元表现为细胞形态、分布正常，几乎无变性、坏死神经元；与S组比较，A组、B组海马神经元可见明显的细胞水肿、核固缩等病理改变，且B组比A组损伤更为严重。结论 延迟心肺复苏不仅降低心脏骤停大鼠ROSC成功率，亦可加重海马组织病理损伤。 　　[关键词] 心肺复苏；脑损伤；自主循环恢复 　　[中图分类号] R459.7 [文献标识码] A [文章编号] 1674-0742（2014）04（a）-0022-02 　　虽然心脏骤停后心肺复苏研究不断深入[1]，自主循环恢复（restoration of spontaneous circulation，ROSC）后脑功能的预后仍是难点问题[2]，心脏骤停患者很难在第一时间得到救治，血流中断时间延长致使脑组织损伤加重。为更好接近临床并且保证大鼠心脏骤停模型成功率，本实验重点探讨心脏骤停后延迟3 min CPR 对大鼠病理损伤的影响。 　　1 材料与方法 　　1.1 动物、试剂、仪器 　　健康SD雄性大鼠54只，体重350-450g；MP50多参数监护仪（德国飞利浦）；HX-200S动物呼吸机（成都泰盟科技有限公司）。 　　1.2 实验方法 　　1.2.1 分组 随机数字表法将大鼠分为假手术组（S组，n=18）；即刻复苏组（A组，n=18）：窒息5±1 min后，常规复苏；延迟复苏组（B组，n=18）：窒息8±1 min（心脏骤停后3 min）后常规复苏。 　　1.2.2 模型制作 本实验参考有关文献并加以改进[3]。大鼠称重，3%戊巴比妥钠（35 mg/kg）腹腔注射麻醉，仰卧固定。正中切口，暴露气管，行气管插管。剥离右侧股动脉，左侧股静脉，24G套管针向近心端穿刺置管后固定。连接压力换能器。连接心电肢体导联，至监护仪正常显示股动脉平均动脉压、心电图。伤口处敷蘸生理盐水纱布。稳定10 min后，呼气末气管夹闭诱导窒息致心脏骤停（CA）后，进行CPR：开放气道，接小动物呼吸机（呼吸频率80 次/min，潮气量6 ml/kg），同时经股静脉推注肾上腺素20 μg/kg。 　　1.2.3 CA标准 心电图呈室颤、停搏或电机械分离，股动脉平均动脉压25 mmHg[4]；动物皮肤粘膜明显发绀。 　　1.2.4 ROSC标准 心电图呈自主节律，股动脉平均动脉压≥60 mmHg[4]，持续时间超过10 min；动物皮肤粘膜发绀明显减轻。 　　1.2.5 标本留取 S组按血管穿刺后0.5 h断头取脑；A组、B组按ROSC后0.5 h断头取脑。 　　1.2.6 检测方法 低温冰台上断头剥离海马后，于4%多聚甲醛中固定至少24 h。脱水、透明、浸蜡及包埋，海马组织5 um厚切片，HE（Hematein Eosin）染色。 　　1.2.7 统计学方法 数据采用SPSS17.0统计软件分析。组间ROSC成功率比较用χ2检验，P0.05有统计学差异。 　　2 结果 　　2.1 ROSC成功率 　　S组成功率100%，A组成功率88.9%，B组成功率50%；B组与A组比较，ROSC成功率明显下降（P0.05）。 　　2.2 各组大鼠海马组织病理观察 　　S组：海马神经元表现为细胞形态、分布、间隙正常，几乎无变性、坏死神经元（图1）；A组：海马神经元有部分变性、坏死，病理损伤较重（图2）；B组：海马神经元细胞出现明显的胞核凝固、深染，胞浆溶解，存在较多坏死神经元，病理损伤比A组更重（图3）。 　　3 讨论 　　学者们[5]对心肺复苏ROSC患者预后相关因素进行分析，薛继可[6]对725例CPR患者进行分析，发现CPR开始时间≤5 min的460例患者ROSC为140例（30.4%），CPR开始时间5 min的265例患者ROSC仅为47例（17.7%）。廖红[7]采用窒息法制作CA大鼠模型，在20只大鼠CA后即刻进行复苏，复苏成功率约为70%，本实验中，A组即刻复苏的复苏成功率为88.9%，可能由于实验条件、生理盐水以及肾上腺素的使用不同，导致实验中的复苏成功率存在一定差异。本实验B组大鼠复苏成功率为50%，与A组比较复苏成功率明显降低（P0.05），这再次证明了心脏骤停持续时间是决定ROSC的关键因素之一，临床上只有真正缩短开始心肺复苏的时间，才有可能根本上改善复苏的预后。