改良J―G法检测新生儿溶血病患者血清胆红素的问题探讨.docVIP

改良J―G法检测新生儿溶血病患者血清胆红素的问题探讨 【摘要】 目的 分析改良J-G法检测新生儿溶血病患者血清胆红素存在的问题。方法 使用改良J-G法分别检测患儿血清、稀释血清以及使用亚硝酸盐法检测血清胆红素项目， 进行统计、分析。结果 改良J-G法检测总胆红素、间接胆红素， 血清与稀释血清检测结果之间差异有统计学意义（P0.05）。结论 使用改良J-G法检测新生儿溶血病患者血清胆红素时， 必要时应稀释血清进行检测， 以免影响检测结果的可靠性。 【关键词】 改良J-G法；新生儿溶血病；血清胆红素 在临床实验中发现， 使用改良J-G法检测新生儿溶血病患者血清胆红素， 当其黄疸较为严重时， 实验检测结果存在一定问题， 现报告如下。 1 材料与方法 1. 1 标本来源 本院排除其他严重疾病、且黄疸较为严重的新生儿溶血病患者血液标本51例， 其中男28例， 女23例。 1. 2 仪器 OLYMPUS AU-2700全自动生化分析仪。 1. 3 试剂 ①国内某品牌改良J-G法总胆红素检测试剂。试剂1：盐酸0.7 mol/L ， 对氨基苯磺酸20 mmol/L ， 柠檬酸0.7 mol/L， 咖啡因 0.18 mol/L。试剂2：亚硝酸钠溶液20 mmol/L。②国内某品牌改良J-G法直接胆红素检测试剂。试剂1：盐酸0.3 mol/L ， 对氨基苯磺酸30 mmol/L 。试剂2：亚硝酸钠溶液10 mmol/L。③兰森生物技术有限公司公司提供总胆红素、直接胆红素亚硝酸盐法检测试剂。RANDOX（Human-Sera分析用人血清基质）定值冻干质量控制血清。 1. 4 方法 由儿科护理人员使用真空采血管， 采集患儿股静脉血液3.00～5.00 ml， 及时送检验科处理备用。首先， 准确吸取离心处理后的血清0.25 ml， 使用生理盐水倍比稀释， 稀释至根据肉眼观察颜色， 判断其大致在正常人血清总胆红素参考值上限水平；然后， 分别吸取血清0.25 ml、各管稀释血清0.25 ml， 放置各自检测试管中， 上机进行改良J-G法胆红素项目实验检测；同时， 血清标本进行亚硝酸盐法胆红素项目检测。稀释血清结果换算：根据稀释后血清实测值在正常人参考值上限水平左右时的检测数据， 依据稀释倍数， 换算出稀释血清测定的实际报告值。 1. 5 统计学方法 检测数据使用SPSS11.5统计软件进行分析。计量资料以均数± 标准差（ x-±s）表示， 采用t检验；计数资料采用χ2检验。P 0.05为差异具有统计学意义。 2 结果 51例新生儿溶血病患者血清胆红素测定结果：间接胆红素为计算值， 数值等于总胆红素测定值减去直接胆红素测定值。改良J-G法测定总胆红素、间接胆红素， 血清与稀释血清检测结果之间差异有统计学意义（P0.05）。见表1。 3 讨论 第3版《全国临床检验操作规程》中， 血清胆红素测定首推改良J-G法。该方法试剂成本较为低廉， 试剂易于保存， 检测结果重复性尚好， 在临床实验室应用较广泛。在没有加速剂存在时， 血清与重氮试剂反应生成直接胆红素， 有加速剂存在时， 所生成的则为总胆红素；总胆红素测定值减去直接胆红素值测定为间接胆红素报告值[1]。在使用国内某较为知名的专业体外诊断试剂生产厂家提供的改良J-G法血清胆红素试剂， 进行新生儿溶血病患者血清胆红素检测时， 发现当间接胆红素含量大约在35.0 μmol/L以上时， 血清胆红素检测结果会出现严重的问题。溶血性黄疸患者， 其血清总胆红素、间接胆红素含量增高， 直接胆红素浓度改变不大[2]。当间接胆红素水平过高， 透过血脑屏障， 可造成中枢神经系统功能障碍， 如不经治疗干预， 可造成永久性损害， 新生儿血清胆红素测定是新生儿溶血病患者光照疗法的重要指征[3]。厂家提供的资料， 总胆红素的线性范围是0～513.0 μmol/L， 直接胆红素的线性范围是0～256.6 μmol/L。而收集严重黄疸的阻塞性黄疸、肝细胞性黄疸患者的血液， 使用改良J-G法检测血清、稀释血清以及亚硝酸盐法检测血清进行胆红素项目比对实验， 三者检测结果差异无统计学意义（P 0.05）。据此， 分析改良J-G法检测新生儿溶血病患者血清总胆红素时， 由于间接胆红素含量较高， 可能因为加速剂的问题， 使其未能完全充分与重氮试剂反应， 以至总胆红素检测结果偏低， 相应的换算出的间接胆红素结果也偏低。只是令人困惑的是， 严重黄疸的肝细胞性黄疸患者， 其血清间接胆红素含量大大高于35.0 μmol/L， 而改良J-G法直接检测血清， 检测结果却未出现所谓的线性问题。有报道， 测定总胆红素， 钒酸氧化法与改良J-G法、胆红素氧化酶法有良好的相关性[4]。该文中提及黄疸严重患者血清标本的检测， 然而却未说明是何种性质的黄疸。严重黄疸的溶血性黄疸患