关于饮用纯净水微生物检验中菌落总数的不确定度检验研究.docVIP

关于饮用纯净水微生物检验中菌落总数的不确定度检验研究 　　摘 要：在进行微生物检验时，应用不确定度检验的目前还很少，通过此种检验方法的应用，可以有效的提升微生物检验结果的科学性，增强检验结果的可用性。在本文中，首先介绍了引用纯净水微生物检验中菌落总数实验，然后在实验中应用了不确定度检验，对菌落总数进行检验，实验结果表明，不确定度检验的方法具备的简便性是非常好的，适合微生物检验。 　　关键词：引用纯净水；微生物检验；菌落总数；不确定度检验 　　前言：在进行微生物检验时，不确定度是一个重要的参数，与测量结果具有很大的关联性，被测量值的分散性都是通过不确定度的表征来赋予的，而且赋予具备合理性，通过不确定度的正确测量和评定，提升了测量结果分析的有效性。现今，微生物检验中越来越认识到不确定检验的重要性，因此开始逐渐的应用不确定检验方法，在饮用纯净水的菌落总数实验中，通过不确定度检验的应用，提升了实验效果的准确性。 　　一、饮用纯净水微生物菌落总数实验 　　（一）实验原理 　　在有氧条件下，通过营养琼脂，在37℃的温度下，培养水样48小时，最后，在1毫升水样内含有的菌落总数就可以得出。实验在实验室内进行，根据规定的方法，不同人员检验日常样品，在检验时，每个样品需要进行平行样检测，此检测需要由同一个实验人员来进行。检测完成规定的组数之后，就可以应用不确定度检验，对菌落总数进行评定[1]。 　　（二）实验材料 　　实验正常进行的基本保证就是实验材料，在本次实验中，是通过不确定检验来对菌落总数进行评定，选择的检验对象为水样，因此，实验所用的材料为饮用纯净水。根据实验的设置，对不同类型的饮用纯净水进行取样，以便于保证检测结果的公正性。 　　（三）实验仪器 　　在进行实验的过程中，需要借助相应的仪器来完成实验，在饮用纯净水微生物检测中菌落总数的实验中，主要用到的实验仪器有高压灭菌锅、电热干燥箱、恒温水浴锅以及恒温培养箱。通过实验仪器与实验试剂的辅助作用，有效的针对饮用纯净水水样进行微生物检验，对其中的菌落总数进行确定。 　　（四）实验方法 　　在进行检验时，所依赖的标准为《生活饮用水标准检验方法微生物指标》。首先要进行充分混匀水样的吸取，在进行吸取时，通过无菌操作的方式来进行，随后，在无菌生理盐水试管中将水样注入进去，混匀稀释之后形成稀释液，浓度为1：10，接着，稀释液再次滴入灭菌生理盐水试管中，形成1：100稀释液，最后重复一次上个步骤，得出1：1000稀释液，将这些稀释液放置在适当的条件下，留做备用。稀释完成之后，取两个灭菌平皿，分别注入未经稀释的水样以及适当稀释度的稀释液，在吸取这两个液体时，都需要用无菌吸管来吸取，注入完成后，再在各自的平皿中将营养琼脂注入进去，营养琼脂的温度约为45℃，注入之后立即进行旋摇，以便于充分的混合[2]。同时，还需要进行营养琼脂空白对照，等到琼脂凝固之后，将平皿翻转过来，放置在培养箱中，培养箱的温度约为36℃，上下浮动1℃的温度范围均可，培养的时间为48小时，培养完成之后，进行菌落计数，在30～300稀释度之间的菌落数，用稀释倍数与平均菌落数相乘，得出的结果就是检测结果，最后，根据相应的数学模型完成计算。 　　二、菌落总数的不确定度检验 　　（一）分析来源 　　在对饮用纯净水的菌落总数进行检验时，不确定度的来源种类比较多：重复性，比如检验环境、培养时间、样品的均匀性、人员计数等，都具备很大的重复性，从而导致不确定度的存在；培养条件，培养时间和培养温度会存在一定的允差，差值的存在就形成了不确定度；取样，在进行水样取样时，体积会对确定性产生影响，在对水样进行稀释时，稀释的体积也同样具有不确定性；实验仪器和实验试剂，比如吸管、培养基等，都会形成不确定度；样品保存条件，时间、温度等都属于保存条件的范畴，当这两个条件发生变动时，菌落总数也会受到一定的影响，进而存在不确定度。不确定度包含A类和B类两种，在实际的微生物检验中，合成不确定度中B类分量所能产生的贡献是比较小的，主要的还是重复测量所带来的，因此，在进行不确定检验时，考虑的不确定度来源主要就是重复性，也就是说，在对不确定度进行评定测量时，采用统计的方法（A类）来进行[3]。 　　（二）不确定度评定 　　根据上面的实验方法，对15份日常水样进行菌落总数的检验，每个水样都形成两个检测结果，并分别取对数值，并计算出两个对数的平均值，最后在形成残差平方和。检测完成之后需要进行相应的计算，计算时所采用的公式为贝塞尔公式，首先将合并样品的标准差计算出来，随后再将检测结果的不确定度计算出来，并对不确定度进行扩展，在进行扩展不确定度计算时，需要根据相应的数值来查询到T分布，最终才能确定扩展不确定度数值[4]。在表示检验结果时，如果选择2次测量